一种基于GC-MS技术鉴别发酵虫草菌丝品种的方法

摘要

本发明提供一种基于GC-MS技术鉴别发酵虫草菌丝品种的方法，具体步骤包括：1)发酵虫草菌丝中挥发性成分的提取；2)确定GC-MS分析发酵虫草菌丝中挥发性成分的条件并对样品进行测定；3)对挥发性化学成分进行定性分析；4)通过化学计量学手段进行GC-MS数据分析，鉴别发酵虫草菌丝的品种。本发明的优点在于选择GC-MS技术对发酵虫草菌丝中挥发性成分进行鉴定，解决了对发酵虫草菌丝品种的鉴别问题；该方法操作简便、实验结果直观可靠，为发酵虫草菌丝产品的质量控制和评价提供一种方法。

主权项

一种基于GC‑MS技术鉴别发酵虫草菌丝品种的方法，包括如下步骤：(a)供试品溶液的制备：精密称取发酵虫草菌丝5～20g，置于500ml的圆底烧瓶中，加入100～250ml的去离子水，另取50ml的无水乙醚作为萃取溶剂，置于250ml的圆底烧瓶中，两个烧瓶装在SDE同时蒸馏萃取装置上，置加热套加热使去离子水沸腾，以45℃油浴加热萃取溶剂，连续提取4～24h，冷却至室温，将U型管和250ml圆底烧瓶里的乙醚层合并，加入NaCl粉末至过量，取出乙醚层，加入过量的无水硫酸钠粉末过夜干燥，滤出干燥剂，取出乙醚层，室温下氮吹至干，得到黄色透明油状物，称重；复溶在100～5000μl的无水乙醚中，4℃下保存，作为供试品溶液；(b)GC‑MS测定条件：色谱柱：HP‑5MS毛细管柱；程序升温条件：初始温度40℃，停留2min，以5℃/min的速度升至70℃，停留2min，以15℃/min的速度升至160℃，停留5min，以2℃/min上的速度升至180℃，停留2min，以5℃/min的速度升至280℃，停留2min；进样方式：分流进样，分流比100∶1；载气流速1ml/min；进样量：1μL；进样口温度：250℃；离子源温度：230℃；接口温度280℃；四级杆温度150℃；离子源电压：70ev；质谱扫描范围：(m/z)35‑480amu；(c)GC‑MS色谱图的测定：将上述步骤(a)得到的供试品溶液，注入GC‑MS联用仪，测定，计算各峰的相对含量；(d)发酵虫草菌丝挥发性成分的鉴定：以NIST谱库检索，对发酵虫草产品挥发性成分进行鉴定；(e)化学计量学分析：通过化学计量学软件进行数据分析，直观区分不同发酵虫草产品和伪品。