化妆品用蚯蚓活性蛋白的提取方法

摘要

本发明公开了一种化妆品用蚯蚓活性蛋白的提取方法，包括以下步骤：取清洗干净的鲜蚯蚓，加入磷酸盐缓冲液，冰浴条件下高速匀浆，得到蚯蚓匀浆液；并分装于离心管中，高速离心，取上清液；加研细的硫酸铵进行盐析，使杂蛋白沉淀析出；将盐析液分装于离心管中，取上清液过0.45µm的膜，取滤液；采用超滤的方式除去大分子物质，然后用截留分子量为20k-50k中空纤维膜组件超滤的方式脱盐，最后冷冻干燥即得蚯蚓活性蛋白；本方法以新鲜的赤子爱胜蚓为原料，采用匀浆、离心、盐析、微滤、超滤、冷冻干燥等技术对其中的活性蛋白进行分离纯化获得了具有较高增殖活性的蚯蚓活性蛋白，不含小分子杂质，纯度高，使用效果好。

主权项

化妆品用蚯蚓活性蛋白的提取方法，其特征是包括如下步骤：a、取清洗干净的鲜蚯蚓，加入20mmol/L、pH为6.8~7.2的磷酸盐缓冲液，冰浴条件下高速匀浆，得到蚯蚓匀浆液，并在4℃下静置2~3h，使蛋白充分溶出；b、将蚯蚓匀浆液分装于离心管中，在4℃下，高速离心20~30min，取上清液；在室温条件下，加研细的硫酸铵进行盐析，达到50%饱和度，使杂蛋白沉淀析出，得盐析液；c、将盐析液分装于离心管中，在4℃下，高速离心20~30min，取上清液过0.45µm的膜，取滤液；d、盐析所述滤液采用0.2µm的中空纤维膜组件超滤的方式除去大分子物质，然后用截留分子量为20k‑50k中空纤维膜组件超滤的方式脱盐，最后冷冻干燥即得所述化妆品用蚯蚓活性蛋白。