一株耐冷冻面包酵母菌株及其基因无痕敲除方法

摘要

本发明公布了一株耐冷冻面包酵母菌株及其构建方法，具体是通过无痕敲除基因NTH1构建的耐冷冻面包酵母BY-14AΔU，保藏编号CGMCC No.7379。无痕基因敲除方法构建耐冷冻面包酵母，是通过融合PCR和酵母整合质粒YIplac211，敲除编码中性海藻糖酶基因NTH1来实现的。本发明实现了将面包酵母NTH1基因快速、高效地无痕敲除，菌株BY-14AΔU在其他发酵性能不受影响的情况下，胞内海藻糖含量较亲本菌株提高了134％；细胞在液体面团中冷冻21天后，存活率达到78％，是亲本菌株的2.6倍。本发明构建的酵母菌中基因组上不残留任何外源基因，因此可以安全的用于工业生产。

主权项

一株耐冷冻面包酵母菌株，具体为面包酵母(Saccharomyces cerevisiae)BY‑14A△U，保藏编号为CGMCC No.7379；所述面包酵母菌株发酵后胞内海藻糖含量占细胞干重11.7％；细胞在液体面团中冷冻21天后，存活率达到78％，是亲本菌株的2.6倍。