发明名称 一种永生化的鸭胚肝细胞系的制备方法和应用
摘要 本发明提供了一种永生化的鸭胚肝细胞系的制备方法,该方法包括:(1)用胰蛋白酶消化法消化鸭胚肝脏,培养该消化液,得到原代培养的鸭胚肝细胞;(2)采用脂质体转染法,将编码hTERT和Marker基因的真核表达质粒导入该原代培养的鸭胚肝细胞;(3)培养该转染的鸭胚肝细胞,用G418筛选该hTERT阳性克隆;(4)培养筛选的该hTERT阳性克隆,连续培养超过50代次,得到永生化的细胞系。该细胞系在体外传代50代以上仍有较好的活力,保持分裂增殖,不发生衰老和凋亡,是一种永生化的细胞系。该永生化的鸭胚肝细胞形态规则,培养条件简单、容易控制,使用方便,为研究鸭病,特别是研究鸭肝炎病毒提供了很好的载体。
申请公布号 CN104726409A 申请公布日期 2015.06.24
申请号 CN201310711849.5 申请日期 2013.12.19
申请人 普莱柯生物工程股份有限公司 发明人 张许科;孙进忠;白朝勇
分类号 C12N5/10(2006.01)I;A61K39/29(2006.01)I;A61P31/14(2006.01)I;G01N33/569(2006.01)I;C12R1/91(2006.01)N 主分类号 C12N5/10(2006.01)I
代理机构 北京华夏正合知识产权代理事务所(普通合伙) 11017 代理人 韩登营
主权项 一种永生化的鸭胚肝细胞系的制备方法,所述方法包括:(1)用胰蛋白酶消化法消化鸭胚肝脏,培养所述消化液,得到原代培养的鸭胚肝细胞;(2)采用脂质体转染法,将编码hTERT和Marker基因的真核表达质粒导入所述原代培养的鸭胚肝细胞;(3)培养所述转染的鸭胚肝细胞,用G418筛选所述hTERT阳性克隆;(4)培养筛选的所述hTERT阳性克隆,连续培养超过50代次,得到永生化的细胞系。
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