发明名称 |
一种永生化的鸭胚肝细胞系的制备方法和应用 |
摘要 |
本发明提供了一种永生化的鸭胚肝细胞系的制备方法,该方法包括:(1)用胰蛋白酶消化法消化鸭胚肝脏,培养该消化液,得到原代培养的鸭胚肝细胞;(2)采用脂质体转染法,将编码hTERT和Marker基因的真核表达质粒导入该原代培养的鸭胚肝细胞;(3)培养该转染的鸭胚肝细胞,用G418筛选该hTERT阳性克隆;(4)培养筛选的该hTERT阳性克隆,连续培养超过50代次,得到永生化的细胞系。该细胞系在体外传代50代以上仍有较好的活力,保持分裂增殖,不发生衰老和凋亡,是一种永生化的细胞系。该永生化的鸭胚肝细胞形态规则,培养条件简单、容易控制,使用方便,为研究鸭病,特别是研究鸭肝炎病毒提供了很好的载体。 |
申请公布号 |
CN104726409A |
申请公布日期 |
2015.06.24 |
申请号 |
CN201310711849.5 |
申请日期 |
2013.12.19 |
申请人 |
普莱柯生物工程股份有限公司 |
发明人 |
张许科;孙进忠;白朝勇 |
分类号 |
C12N5/10(2006.01)I;A61K39/29(2006.01)I;A61P31/14(2006.01)I;G01N33/569(2006.01)I;C12R1/91(2006.01)N |
主分类号 |
C12N5/10(2006.01)I |
代理机构 |
北京华夏正合知识产权代理事务所(普通合伙) 11017 |
代理人 |
韩登营 |
主权项 |
一种永生化的鸭胚肝细胞系的制备方法,所述方法包括:(1)用胰蛋白酶消化法消化鸭胚肝脏,培养所述消化液,得到原代培养的鸭胚肝细胞;(2)采用脂质体转染法,将编码hTERT和Marker基因的真核表达质粒导入所述原代培养的鸭胚肝细胞;(3)培养所述转染的鸭胚肝细胞,用G418筛选所述hTERT阳性克隆;(4)培养筛选的所述hTERT阳性克隆,连续培养超过50代次,得到永生化的细胞系。 |
地址 |
471000 河南省洛阳市高新区凌波路5号 |