一种基于免疫金的电化学传感元件的制备方法及其应用

摘要

本发明公开了一种基于免疫金的电化学传感元件的制备方法，本发明制备了通用的硝基咪唑类结构半抗原，并采用活化酯法，将硝基咪唑半抗原与载体蛋白(BSA和OVA)偶联制备免疫原和包被原，偶联分子摩尔比分别为11:1和10:1。同时制备了硝基咪唑抗体，效价为1:100000，制备免疫纳米金；利用单分子膜自组装技术在金电极上形成单分子膜，再通过DCC和NHS与免疫纳米金联接，制备了传感元件。该传感元件对甲硝唑、替硝唑、地美硝有良好的响应，交叉反应率达90％以上，可测定0.001-100mg/L浓度范围内的甲硝唑、替硝唑、地美硝唑及其代谢物，检测限约为0.0019mg/L，回收率约为90％。

主权项

一种基于免疫金的电化学传感元件的制备方法，其特征在于：所述方法的具体步骤如下：(1)用0.1mol/L NaOH和0.1mol/L HNO₃分别淋洗金电极三次，每次1min，再置于新鲜配制的piranha溶液，浸泡30min；(2)取出金电极，超纯水淋洗1min，置于超纯水中超声清洗3min，无水乙醇中超声清洗3min，重复3次；(3)依次用0.3μm和0.05μmAl₂O₃粉末抛光至呈镜面后，金电极置于piranha溶液，浸泡30min，重复步骤(2)，然后用高纯氮吹干金电极表面；(4)把金电极浸于三巯基丙酸溶液中温育12h，依次用超纯水、无水乙醇淋洗三次，每次1min，然后用高纯氮吹干金电极表面，即为MPA/金电极，然后将金电极浸于碳二亚胺盐酸盐溶液和N‑羟基硫代琥珀亚胺溶液的混合液中12h后，用超纯水淋洗3min，再将金电极浸于含有免疫金的磷酸缓冲液中，4℃过夜，最后用超纯水清洗，高纯氮吹干金电极表面，即为免疫金/MPA/金电极。