含有鼠神经生长因子的表达载体及细胞

摘要

本发明涉及用于表达生长因子的表达载体和细胞，具体地，本发明涉及含有鼠神经生长因子的重组载体及重组细胞，本发明还涉及所述重组细胞的制备方法、鼠神经生长因子的纯化方法以及所述重组载体或重组细胞用于制备鼠神经生长因子的用途。本发明利用哺乳动物细胞表达系统成功表达了鼠神经生长因子，并进一步证明了该鼠神经生长因子序列正确且具有较高的比活性高，具有良好的应用前景。

主权项

重组细胞，其含有重组载体，所述重组载体含有鼠神经生长因子基因的核酸序列，所述载体为Freedom^TM pCHO1.0，所述细胞为CHO细胞，所述重组细胞为经过氨甲喋呤和嘌呤霉素加压筛选培养后的细胞，所述加压筛选为两个阶段的加压筛选，所述第一阶段筛选中氨甲喋呤的浓度为100～200nM；第二阶段筛选中氨甲喋呤的浓度为500～1000nM；所述第一阶段筛选中嘌呤霉素的浓度为10～20μg/mL；第二阶段筛选中嘌呤霉素的浓度为30～50μg/mL。