一种药物性耳聋基因多通道荧光PCR检测试剂盒

摘要

本发明公开了一种药物性耳聋基因多通道荧光PCR检测试剂盒，针对药物耳聋相关基因mtDNA 12S rRNA：1555A>G、1494C>T、1095T>C、827A>G上共四个位点设计2对特异性引物和4条TaqMan探针，以管家基因β-Actin作为内参，设计1对特异性引物和探针，以监测样本模板、反应体系的有效性，避免出现假阴性，同时阴性、阳性质控的设定保证检测结果准确性。本发明首次实现了应用多通道荧光PCR方法在同一个反应管中同时检测药物性耳聋的四个突变位点，该方法操作简便快速、准确、高通量、成本低，闭管操作避免交叉污染，使得耳聋筛查目的性强、筛查范围广，有效预防药物性耳聋发生，易于推广及应用。

主权项

一种药物性耳聋基因多通道荧光PCR检测试剂盒，其特征在于，以mtDNA 12S rRNA基因的1555A>G、1494C>T、1095T>C、827A>G突变为检测对象，设计特异性引物和探针，所述特异性引物包括用于扩增1555A>G、1494C>T的引物1，其序列如序列表中SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2所示；用于扩增1095T>C、827A>G的引物2，其序列如序列表中SEQ ID NO:3和SEQ ID NO:4所示；所述探针为特异性检测mtDNA 12S rRNA基因的1555、1494、1095、827位点是否含有突变，其探针序列分别如序列表中SEQ ID NO:5至SEQ ID NO:8所示。