用于黄瓜‘粤秀3号’杂交种子纯度鉴定的引物及方法

摘要

本发明公开了一种用于黄瓜‘粤秀3号’杂交种子纯度鉴定的引物及方法。该方法包括（1）黄瓜基因组DNA的提取；（2）利用筛选得到的特异性引物进行PCR扩增；（3）对PCR扩增产物进行凝胶电泳；（4）根据凝胶条带上的相对位置判断种子纯度。本发明的方法可将‘粤秀3号’杂交种子与其母本、父本种子区分开来，快速检测出杂交种子的纯度。本方法具有快速、准确、低成本，操作简单等优点，能够替代传统杂交种子纯度鉴定的方法，具有较高的商业应用价值。

主权项

一种用于黄瓜‘粤秀3号’杂交种子纯度鉴定的方法，包括如下步骤：（1）提取待检黄瓜种子或幼苗基因组DNA；（2）以黄瓜基因组DNA为模板，使用引物组1或引物组2进行PCR扩增,引物组1的序列为：3B‑10‑F：5’‑CATCACGACCCTCTCCATCT‑3’（SEQ ID NO:1），3B‑10‑R：5’‑GGGTTTGATAGTGGAGATTATTCA‑3’（SEQ ID NO:2）；引物组2的序列为：2B‑41‑F：5’‑CACCGAGAACGAAAGAAGGA‑3’（SEQ ID NO:3），2B‑41‑R：5’‑ TCTAAGGTGGGAGGGAAACC‑3’（SEQ ID NO:4）；（3）对扩增的产物进行凝胶电泳；（4）对电泳结果进行分析，只有同时具有亲本特异性条带的单株才为真正的杂交种，缺少其中的任意一条带记为假杂种，其中，引物组1产生128bp的母本特异标记，产生158bp的父本特异标记，引物组2产生177bp的母本特异标记，189bp的父本特异标记为。