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一种双期发酵生产海藻酵素的方法，其特征是采用枯草芽孢杆菌进行一期发酵，再采用植物乳杆菌进行二期发酵获得具有酶活性和特征性寡糖的海藻酵素，包括以下步骤：（1）原料处理：选择符合食品卫生标准的海藻原料，鲜海藻原料或干海藻复水后经剪切、加水均质后移入发酵罐，搅拌灭菌，降温至30～50℃备用；（2）发酵菌种准备：将食用级枯草芽孢杆菌固体干粉菌剂与植物乳杆菌干粉菌剂，接种前用无菌生理盐水分别配制成5～20%的菌悬液，备用；（3）一期发酵：将灭菌好的发酵基质30～50℃保温状态下，按接种量1～2%无菌接入配制好的枯草芽孢杆菌悬液，搅拌发酵，发酵条件：30～50℃发酵2～5天，停止搅拌，结束发酵；（4）二期发酵：一期发酵结束以后，温度降至20～40℃，按接种量1～2%无菌接入配制好的植物乳杆菌悬液，20～40℃，搅拌5分钟，停止搅拌，静置培养2～4天，pH 4～5；（5）后期处理：将发酵好的海藻酵素通过固液分离获得液体酵素，亦可进一步将液体酵素通过喷雾干燥制成海藻酵素干粉；（6）活性成分检测：该方法获得的海藻酵素具有蛋白酶活性、淀粉酶活性，同时具备海藻活性寡糖等活性成分，均可采用相关国标方法检测。 |
