基于体外共培养激活Notch-1信号通路的方法

摘要

本发明公开了一种基于体外共培养激活Notch-1信号通路的方法，属于生物信息学技术领域。该方法将乳腺癌细胞和稳定表达Notch-1配体的间质细胞分别在含体积分数10%小牛血清的DMEM培养基中培养后用PBS缓冲液清洗并收集稳定表达Notch-1配体的间质细胞；在含体积分数10%小牛血清的DMEM培养基中培养间质细胞，按1:1-2:1将稳定表达Notch-1配体的间质细胞加入到乳腺癌细胞中培养而实现激活乳腺癌细胞中Notch-1信号通路。本发明模拟在体内环境中癌细胞中Notch-1与间质细胞表达的Jagged-1相互作用来激活Notch-1信号通路，克服了传统方法中过表达的标准量难以确定、转染的效率难以确定、部分细胞没有被转染的缺陷，避免了过表达方法中过表达无法全面有效的激活Notch-1信号通路、所得生物学结果不客观的情况。

主权项

一种基于体外共培养激活Notch‑1信号通路的方法，其特征在于包括如下步骤：（1）将乳腺癌细胞和稳定表达Notch‑1配体的间质细胞分别在含体积分数10%小牛血清的DMEM培养基中培养；（2）待步骤（1）中的两种细胞分别生长到80%的密度，用PBS缓冲液清洗并收集稳定表达Notch‑1配体的间质细胞；（3）在含体积分数10%小牛血清的DMEM培养基中培养间质细胞，按1:1‑2:1将稳定表达Notch‑1配体的间质细胞加入到乳腺癌细胞中；共同培养0.5～48h，实现激活乳腺癌细胞中Notch‑1信号通路。