使用分析物和过程控制信号的单次读取确定而鉴定含分析物的样品的方法和设备

摘要

本发明公开了用于检测含内控的反应混合物中的分析物的设备和方法。使用核酸的扩增和检测阐述了本发明，其中扩增反应包含外源性内控。检测信号的幅度用作鉴定无效试验、鉴定分析物阴性的有效试验以及鉴定分析物阳性的试验的变量。对表明探针杂交的信号进行检测可用于在只使用单个可检测标记物的验证反应中指定分析物核酸的存在与否，并且不用区分由内控探针结合和分析物探针结合所贡献的信号的比例。

主权项

一种采用过程控制确定包含内控的样品中第一分析物存在与否的方法，所述方法用于非诊断和非治疗目的且包括以下步骤：(a)制备待测试所述第一反应物的存在的反应混合物，所述反应混合物包含：所述样品接触所述内控后生成内控信号的内控探针，如果第一分析物存在于所述样品中，则在接触所述第一分析物后生成第一分析物信号的第一分析物探针，以及任选地如果第二分析物存在于所述样品中，则在接触第二分析物后生成第二分析物信号的第二分析物探针；(b)测量(i)所述内控探针和所述第一分析物探针所产生的组合信号而不用区分所述内控信号与所述第一分析物信号，并且(ii)任选地如果所述第二分析物存在于所述反应混合物中则测量所述第二分析物信号；以及(c)在没有独立测量贡献所述组合信号的内控信号和第一分析物信号任一的情况下确定以下哪一情形适用，(i)所述样品不含所述第一分析物，条件是所述组合信号的幅度小于第一分析物截止值并且所述组合信号的幅度大于有效性截止值，或所述第二分析物探针包含在所述反应混合物中，在步骤(b)中测量所述第二分析物信号，而在步骤(b)中测量的所述第二分析物信号的幅度大于第二分析物截止值，从而确立所述样品包含所述第二分析物；(ii)所述样品包含所述第一分析物，条件是所述组合信号的幅度大于所述第一分析物截止值，以及(iii)无法确定所述样品是否包含所述第一分析物，条件是所述组合信号的幅度小于所述有效性截止值，并且所述第二分析物探针包含在所述反应混合物中，在步骤(b)中测量所述第二分析物信号，而在步骤(b)中测量的所述第二分析物信号的幅度小于所述第二分析物截止值，其中所述第一分析物截止值的信号量大于所述有效性截止值的信号量，其中所述内控信号的可检测最大值不能超过所述第一分析物截止值，其中所述内控探针和所述第一分析物探针各自用相同的可检测标记物进行可检测地标记，使得所述内控信号和所述第一分析物信号是由相同的可检测标记物发射的，其中步骤(a)的反应混合物中内控和第一分析物每一项的存在与它们的缺失相比独立提高步骤(b)中测量的组合信号的幅度，并且其中该方法不包括测量与组合信号分开的第一分析物信号或内控信号。