京尼平交联弹性蛋白水凝胶的制备方法

摘要

本发明公开了京尼平交联弹性蛋白水凝胶的制备方法，首先通过酸降解弹性蛋白制得水溶性弹性蛋白α-弹性蛋白，然后利用α-弹性蛋白的温敏性通过京尼平对其进行交联制备出弹性蛋白水凝胶。通过此方法制得的弹性蛋白水凝胶具有温敏性：在室温下为液态，高于室温时凝聚形成凝胶。同时本发明制得的水凝胶具有多孔结构，在药物释放方面具有很好的应用前景。

主权项

京尼平交联弹性蛋白水凝胶的制备方法，其特征在于，按照下述步骤进行：步骤1，将α‑弹性蛋白粉末加入蒸馏水磁力搅拌下使其完全悬浮于水中；其中α‑弹性蛋白溶液浓度为50‑200mg/mL，搅拌时间为30min，所述α‑弹性蛋白购于sigma，数均分子量为70—72KD；步骤2，将质量分数为1％的京尼平水溶液加入步骤1制得的悬浮液中进行交联反应并定形，定形后用蒸馏水清洗表面未反应的京尼平小分子至清洗完全，制得弹性蛋白水凝胶；其中京尼平与弹性蛋白质量比为0.5‑1％；交联反应温度为10‑20℃，时间为12‑24h；定形温度为37℃，时间为2‑5h；所述α‑弹性蛋白按照如下步骤进行制备：(1)用草酸溶液煮沸降解弹性蛋白，脱除脂肪及其他类型蛋白质；(2)用草酸溶液煮沸降解(1)制得的弹性蛋白至全部降解，得到水解弹性蛋白；(3)使用氢氧化钠溶液调节(2)所得的溶液pH值，收集沉淀；(4)清洗(3)收集的沉淀，冻干，得到纯净α‑弹性蛋白，备用；在上述弹性蛋白的制备过程中，所述步骤(1)基质材料为牛颈韧带经丙酮浸泡进行初步脱脂，浸泡时间为24h，并切成5mm×5mm×5mm规则粒状得到；所述的草酸溶液浓度为0.3‑0.7mol/L，降解时间为30‑60min；用蒸馏水洗净表面油脂及其他类型蛋白质；所述步骤(2)所用草酸溶液浓度为1‑2mol/L，降解时间为4‑6h；所述步骤(3)所用氢氧化钠溶液浓度为1‑6mol/L，调节pH值到4‑5，弹性蛋白凝聚形成沉淀；所述步骤(4)沉淀采用大量蒸馏水除去小分子物质；冻干时间为24h；冻干后弹性蛋白研磨成细粉状。