糖蜜中生物素的提取方法及其薄层层析扫描检测方法

摘要

本发明公开了一种糖蜜中生物素的提取方法，以糖蜜为原料，经N,N-二甲基甲酰胺提取，无水乙醇洗涤，盐酸苯肼溶液提取，吸附剂吸附，最终得到含生物素的样品液。本发明还提供了一种生物素的薄层层析扫描检测方法，(1)取待检测样品液，点在硅胶板上，在加有展开剂的展开缸内展开，然后将薄层板拿出放在通风柜中晾干；(2)展完后晾干的展板，用染色液喷雾染色，得到与背景对比明显的标准品的斑点和样品的斑点；(3)利用薄层扫描仪以530nm吸收波长进行薄层层析扫描，计算出样品液中生物素的质量浓度。具有简单、快速、准确、可靠、稳定等优点。

主权项

一种糖蜜中生物素的提取方法，其特征在于：步骤如下：(1)取糖蜜10g，加15～25ml N,N‑二甲基甲酰胺，搅拌均匀，过滤，用20～40ml无水乙醇冲洗滤渣，过滤，将滤渣加入到70～100ml无水乙醇中，在70～78℃、40Hz、400～500W条件下超声处理28～32min，然后趁热过滤，得滤液，滤液经旋转蒸发得样品粗液；(2)取2ml盐酸苯肼溶液，加入到上述样品粗液中，混匀，在90～98℃下水浴加热28～32min，然后放在‑10～‑26℃下冷冻30～40分钟，取出，除去下层沉淀，得上清液；所述盐酸苯肼溶液是通过以下方法制备得到的：称取盐酸苯肼0.3g，加3ml蒸馏水，加热溶解；称取0.45g乙酸钠，加入3ml蒸馏水溶解；将两种液体合并，即得；(3)取0.01～0.02g吸附剂，加入到步骤(2)所得上清液中，搅拌吸附0.5～1h，然后6000～8000转/分离心，得上清液，即为生物素溶液；所述吸附剂是通过以下方法制备得到的：取硅藻土1g、活性白土1g和糖用活性炭1g，混合混匀，即得。