甘薯近缘野生种抗茎线虫病抗性鉴定方法

摘要

本发明公开了一种甘薯近缘野生种抗茎线虫病抗性鉴定方法，属农作物近缘野生种病害抗性鉴定方法。将待鉴定的甘薯野生种栽种于盛有消毒土壤的花盆中，每盆栽种1棵。用根部滴加法向每棵野生种苗接种200头茎线虫，后在25℃，80%湿度，光周期14/10（L/D）的条件下培养。每天适量浇水，将花盆中土壤湿度控制在18-25%范围内。培养40天后，挖取野生种地下茎部分，用解剖剪将茎杆纵向剖开，测量茎杆内茎线虫病受害面积，根据受害部分占茎杆的比例划分病情指数，确定野生种的抗性等级。该鉴定方法处理手段科学有效，操作过程简单，实验周期短，且能够避免试验材料对环境造成的污染。试验结果能够全面的体现甘薯近缘野生种对茎线虫病的抗性水平。

主权项

一种甘薯近缘野生种抗茎线虫病抗性鉴定方法，其特征是：将待鉴定的甘薯近缘野生种单棵栽种于花盆中，采用根部滴加法向每盆接种200头茎线虫，40天后挖取甘薯近缘野生种地下茎部分，对茎线虫病的为害情况进行调查，评价甘薯近缘野生种抗茎线虫病抗性；具体按如下步骤进行：(1)茎线虫培养：在田间采集茎线虫病发病薯块，带回实验室后用浅盘法分离茎线虫；镜检确定为甘薯茎线虫后，用1％硫酸链霉素消毒，灭菌水冲洗3次，采用打孔法将茎线虫接种于茎线虫高感品种栗子香薯块中，用石蜡封口，置于25℃培养箱中培养，备用；(2)待测材料准备：向直径为10cm的圆形塑料花盆中装入1kg灭菌后的土壤，将待测甘薯近缘野生种栽种于花盆中，每盆栽种1棵；将甘薯近缘野生种放置于植物生长间中，在25℃,80％湿度，光周期14L/10D的条件下培养；每天浇水，将花盆中土壤湿度控制在18‑25％范围内；(3)待甘薯近缘野生种幼苗长出4片真叶时接入茎线虫；茎线虫接种时，先在幼苗根围打一深5cm的小孔，将5ml消毒的茎线虫悬浮液，含200头茎线虫加入到小孔中，后用土将孔填平；每个鉴定的甘薯近缘野生种栽种5盆，即5次重复，以甘薯品种栗子香为感病对照；接种茎线虫40天后对茎线虫病的发病情况进行调查；(4)发病情况调查：将甘薯近缘野生种苗挖出后用清水冲洗干净，用解剖剪将地下茎剖开，测量受害部宽度，根据受害部所占比例对病害进行分级；分级标准：0级：全株不发病；1级：开始发病，尚不明显；2级：受害部达全株1/3；3级：受害部达全株1/2；4级：受害部达全株2/3；5级：全株发病；对样品进行分级后，根据以下公式计算病情指数：分级标准：高感：病情指数≥80％；感病：80％＞病情指数≥60％；中抗：60％＞病情指数≥40％；抗病：40％＞病情指数≥20％；高抗：20％＞病情指数。