快速检测工业巴氏酵母酯类代谢基因的方法

摘要

本发明涉及生物技术，特别涉及一种快速检测工业巴氏酵母酯类代谢基因的方法，包括总RNA的提取、逆转录反应制备cDNA模板、多重PCR反应、毛细血管电泳、产物片段分析，针对工业巴氏酵母酯类代谢相关基因ATF1-Sc、ATF1-Sb、ATF2-Sc、ATF2--Sb、EEB1-Sc、EEB1-Sb、EHT1-Sc、EHT1-Sb、IAH1-Sc、IAH1-Sb。本发明采用的GeXP多重基因表达定量分析技术与常规的基因表达定量分析技术（荧光定量PCR）相比具有更强的特异性和灵敏性、自动化程度高等特点，保证了结果的可靠性和可重复性，大大缩短了实验时间。本发明有利于在不同生产条件下，控制发酵过程中酯类代谢及含量，提高啤酒的风味典型性及一致性；并可以通过快速调整啤酒中酯类风味，突出产品特色及进行新产品的开发。

主权项

一种快速检测工业巴氏酵母酯类代谢基因的方法，包括总RNA的提取、逆转录反应制备cDNA模板、多重PCR反应、毛细管电泳、产物片段分析，其特征在于针对工业巴氏酵母酯类代谢相关基因ATF1‑Sc、ATF1‑Sb、ATF2‑Sc、ATF2‑Sb、EEB1‑Sc、EEB1‑Sb、EHT1‑Sc、EHT1‑Sb、IAH1‑Sc、IAH1‑Sb，逆转录反应制备cDNA模板应用引物为500nM SEQ ID NO.2、500nM SEQ ID NO.4、1.5μM SEQ ID NO.6、500nM SEQ ID NO.8、62.5nM SEQ ID NO.10、7.81nM SEQ ID NO.12、1.5μM SEQ ID NO.14、500nM SEQ ID NO.16、500nM SEQ ID NO.18和125nM SEQ ID NO.20合成cDNA第一链；多重PCR反应中以所述的cDNA第一链为模板，应用引物为SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.3、SEQ ID NO.5、SEQ ID NO.7、SEQ ID NO.9、SEQ ID NO.11、SEQ ID NO.13、SEQ ID NO.15、SEQ ID NO.17和SEQ ID NO.19。