一种制备副猪嗜血杆菌病菌影疫苗的方法及其产品和应用

摘要

本发明公开了一种制备副猪嗜血杆菌病菌影疫苗的方法及其产品和应用。本发明将突变的噬菌体裂解E基因Eprom（SEQ ID NO：1所示）与pBV220连接后得到高效裂解质粒载体pBV-Eprom。将pBV-Eprom转化到副猪嗜血杆菌中在37℃下进行增殖，然后于42℃下诱导Eprom基因表达，收集终末表达产物得到副猪嗜血杆菌菌影。其中，Eprom是通过将噬菌体裂解基因E的启动子区进行突变获得的，Eprom使得培养菌的温度从现有的28℃变成37℃，而且具有更高的裂解效率、更高的起始诱导浓度和规模化生产能力，发酵罐培养裂解效率高达99.99995%。本发明的副猪嗜血杆菌病菌影疫苗具有良好的安全性和免疫保护效力，可以刺激机体产生高滴度的抗体，且能够对不同血清型的副猪嗜血杆菌强毒株的攻击提供良好的交叉免疫保护。

主权项

一种制备副猪嗜血杆菌病菌影疫苗的方法，其特征在于包括以下步骤：(1)构建含有噬菌体裂解基因E的裂解载体，其中所述的噬菌体裂解基因E为突变的噬菌体裂解基因E，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示；(2)将该裂解载体转化到副猪嗜血杆菌中，得到含有裂解载体的副猪嗜血杆菌转化子；(3)将该副猪嗜血杆菌转化子在37℃进行增殖培养；(4)诱导该突变的噬菌体裂解基因E的表达，收集形成的菌影，得到副猪嗜血杆菌病菌影疫苗。