核酸等温扩增反应检测方法及应用该方法的检测试剂盒

摘要

本发明公开一种重组酶介导的核酸等温扩增反应检测方法，包括以下步骤：步骤1：制备扩增反应体系，该扩增反应体系主要包含以下组份：a、待检测核酸样品；b、一对与核酸样品杂交的寡核苷酸引物1和引物2；c、荧光探针，该荧光探针为分子信标、荧光共振、蝎子探针和分子火炬的一种或几种，荧光探针浓度为50-900nM/L；d、重组酶；e、DNA聚合酶；f、单链DNA结合蛋白；g、扩增反应缓冲液。本发明还提供一种重组酶介导的核酸等温扩增检测试剂盒。本发明核酸等温扩增反应检测方法及应用该方法的检测试剂盒，体系复杂性降低和试剂成本降低，探针序列合成容易，探针的设计容易，方便了实际应用的使用和推广。

主权项

一种重组酶介导的核酸等温扩增反应检测方法，其特征在于包括以下步骤：步骤1：制备扩增反应体系，该扩增反应体系主要包含以下组份：a、待检测核酸样品；b、一对与核酸样品杂交的寡核苷酸引物1和引物2；c、荧光探针，该荧光探针为分子信标、荧光共振、蝎子探针和分子火炬的一种或几种，荧光探针浓度为50‑900nM/L；d、 重组酶；e、 DNA聚合酶；f、 单链DNA结合蛋白；g、 扩增反应缓冲液；步骤2：等温扩增反应，将步骤1中的组份混合后，将该反应体系放置在密闭容器中，在25℃‑45℃中等温扩增反应，并用荧光检测装置同时检测反应体系中荧光信号的变化，根据荧光信号变化的时间和强度对核酸样品进行定性和定量检测。