发明名称 一种甘草的组织培养快繁方法
摘要 本发明公开了一种甘草的组织培养快繁方法,即以甘草带腋芽茎段为外植体建立了甘草离体快繁体系,为解决甘草规模化生产奠定基础。本发明以带腋芽茎段为外植体,通过丛生芽诱导、增殖培养、根苗诱导以及试管苗驯化移栽等过程实现了甘草的组织培养快速繁殖,以期为甘草的产业化发展提供技术支持。
申请公布号 CN104686345A 申请公布日期 2015.06.10
申请号 CN201510086063.8 申请日期 2015.02.24
申请人 陈桂容 发明人 陈桂容
分类号 A01H4/00(2006.01)I 主分类号 A01H4/00(2006.01)I
代理机构 玉林市振盛专利商标代理事务所 45109 代理人 吴安仪
主权项 一种甘草的组织培养快繁方法,其特征在于包括以下工艺步骤:(1)外植体的处理:选取健壮甘草植株上切取带腋芽的茎段作为外植体,剪去叶片,切成3.0~5.0长的带有1~2个腋芽的节段先用洗衣粉水冲洗1~3h,再用毛轻刷洗外植体表面将其表面的尘土和部分菌体去除,然后用自来水冲洗1~3h后置于超净工作台中,先用75%乙醇消毒5~30s后用无菌水洗3~5次,再用0.1%升汞溶液消毒5~10min,用无菌水冲洗4~6次再用无菌滤纸擦干表面的水珠后备用;(2)丛生芽导:将步骤(1)处理后的带腋芽茎段切成1.5~2.5cm小段并接种到诱导培养基上,先在25~28℃条件下全暗培养1~5天,然后置于每天光照10~12小时,光照强度为1500~3000lx,直至诱导形成丛生芽;(3)增殖培养:将步骤(2)培养获得的嫩芽长至约2cm时切离并转入增殖培养基上进行继代培养,接种后先在25~28℃条件下全暗培养1~4天,然后置于每天光照12~16小时,光照强度为3000~5000lx,置于培养温度为25~28℃的条件下培养,多次反复切割进行继代培养,以得到更多的丛生芽;(4)生根培养:当步骤(2)或(3)的丛生芽长至2.5~3.5cm高时,将丛生芽切割成单苗接种至生根培养基中进行生根培养,接种后先在25~28℃条件下全暗培养1~4天,然后置于每天光照12~16小时,光照强度为2000~3000lx,培养温度为25~28℃的条件下培养直至长出根;(5)试管苗移栽:当小苗长出的新根系长达3cm左右时,并且长出侧根,苗高5cm以上时,将培养瓶瓶盖打开并置于自然光照下炼苗5~7天后,将试管苗从培养瓶中取出,洗掉根部培养基,尽量不伤害根部,栽入经灭菌过的蛭石中。
地址 537000 广西壮族自治区玉林市玉州区人民中路32号