主权项 |
一种甘草的组织培养快繁方法,其特征在于包括以下工艺步骤:(1)外植体的处理:选取健壮甘草植株上切取带腋芽的茎段作为外植体,剪去叶片,切成3.0~5.0长的带有1~2个腋芽的节段先用洗衣粉水冲洗1~3h,再用毛轻刷洗外植体表面将其表面的尘土和部分菌体去除,然后用自来水冲洗1~3h后置于超净工作台中,先用75%乙醇消毒5~30s后用无菌水洗3~5次,再用0.1%升汞溶液消毒5~10min,用无菌水冲洗4~6次再用无菌滤纸擦干表面的水珠后备用;(2)丛生芽导:将步骤(1)处理后的带腋芽茎段切成1.5~2.5cm小段并接种到诱导培养基上,先在25~28℃条件下全暗培养1~5天,然后置于每天光照10~12小时,光照强度为1500~3000lx,直至诱导形成丛生芽;(3)增殖培养:将步骤(2)培养获得的嫩芽长至约2cm时切离并转入增殖培养基上进行继代培养,接种后先在25~28℃条件下全暗培养1~4天,然后置于每天光照12~16小时,光照强度为3000~5000lx,置于培养温度为25~28℃的条件下培养,多次反复切割进行继代培养,以得到更多的丛生芽;(4)生根培养:当步骤(2)或(3)的丛生芽长至2.5~3.5cm高时,将丛生芽切割成单苗接种至生根培养基中进行生根培养,接种后先在25~28℃条件下全暗培养1~4天,然后置于每天光照12~16小时,光照强度为2000~3000lx,培养温度为25~28℃的条件下培养直至长出根;(5)试管苗移栽:当小苗长出的新根系长达3cm左右时,并且长出侧根,苗高5cm以上时,将培养瓶瓶盖打开并置于自然光照下炼苗5~7天后,将试管苗从培养瓶中取出,洗掉根部培养基,尽量不伤害根部,栽入经灭菌过的蛭石中。 |