一种快速鉴定转基因抗虫棉“荃银2号”种子真实性及其纯度的SSR标记方法

摘要

本发明公开了一种快速鉴定转基因抗虫棉“荃银2号”种子真实性及其纯度的SSR标记方法，步骤包括：分别提取待检测的转基因抗虫棉“荃银2号”种子及其父母本双亲种子的基因组DNA，分别采用6对SSR核心引物对进行PCR扩增并对扩增产物进行凝胶电泳检测，如果6对引物对中PCR扩增产物满足4对或4对以上同时具有父母本双亲的特异条带，即为转基因抗虫棉“荃银2号”，然后计算获得种子纯度；本发明所述方法仅在5h之内即可完成一份“荃银2号”种子纯度的检测，同时本方法还可辨别“荃银2号”品种真伪，其检测结果准确稳定、快速高效且实用简单，适于大批量“荃银2号”种子纯度和品种真实性的快速检测。

主权项

一种快速鉴定转基因抗虫棉“荃银2号”种子真实性的SSR标记方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)分别提取待检测的转基因抗虫棉“荃银2号”种子及其父母本双亲种子的基因组DNA；(2)以步骤(1)的基因组DNA为模板，分别采用NAU2026引物对、NAU1369引物对、NAU1167引物对、NAU1102引物对、NAU1196引物对和NAU2684引物对进行PCR扩增并对扩增产物进行凝胶电泳检测，其中，所述各引物对的碱基序列分别为：SEQ ID NO:1：NAU2026F：5’‑GAATCTCGAAAACCCCATCT‑3’，SEQ ID NO:2：NAU2026R：5’‑ATTTGGAAGCGAAGTACCAG‑3’；SEQ ID NO:3：NAU1369F：5’‑TGGCAGAGATGAATGTAAGC‑3’，SEQ ID NO:4：NAU1369R：5’‑GGTAACGGATGGAAAATCAC‑3’；SEQ ID NO:5：NAU1167F：5’‑CTGACTTGGACCGAGAACTT‑3’，SEQ ID NO:6：NAU1167R：5’‑AAGAGCCCTGGACAATGATA‑3’；SEQ ID NO:7：NAU1102F：5’‑ATCTCTCTGTCTCCCCCTTC‑3’，SEQ ID NO:8：NAU1102R：5’‑GCATATCTGGCGGGTATAAT‑3’；SEQ ID NO:9：NAU1196F：5’‑ATCTGTTTCCGTACCCTCAA‑3’，SEQ ID NO:10：NAU1196R：5’‑ATGGTTGCCCAAACAATACT‑3’；SEQ ID NO:11：NAU2684F：5’‑CTCCTATCATTGTCCCGTCT‑3’，SEQ ID NO:12：NAU2684R：5’‑CCAAGCTAGGTTTGGGTTTA‑3’；(3)分析步骤(2)的扩增产物的凝胶电泳结果，如果6对引物对中PCR扩增产物满足4对或4对以上同时具有父母本双亲的特异条带，即为转基因抗虫棉“荃银2号”。