一种生产禽脑脊髓炎病毒灭活疫苗的方法

摘要

本发明公开了一种生产禽脑脊髓炎病毒灭活疫苗的方法，所述方法包括以下步骤：a.选择细胞系作为制苗用细胞；b.制苗用细胞的传代与培养；c.生产用毒种的繁殖；d.生产制苗毒液；e.疫苗制备。本发明采用传代细胞系作为制苗用细胞，并筛选了敏感细胞系，加强了病毒与细胞的匹配性。本发明具有生产工艺简单稳定、易操作、批间差异小、成本低等特点，生产的禽脑脊髓炎病毒灭活疫苗安全性和免疫原性好。

主权项

一种生产禽脑脊髓炎病毒灭活疫苗的方法，其特征在于：包括如下步骤：a. 选择细胞系作为制苗用细胞；b. 制苗用细胞的传代与培养制苗用细胞形成良好单层时，经EDTA‑胰酶消化后，加入细胞生长液制备成细胞悬液，用于继续传代或接种病毒；c. 生产用毒种的繁殖将制苗用细胞悬液，分装细胞培养瓶，同时接种禽脑脊髓炎鸡胚组织毒，培养72h时更换细胞维持液，继续培养48～72h，收获培养物，为一代细胞毒；一代细胞毒传代培养，为二代细胞毒；取一代、二代细胞毒作为生产用毒种；d. 生产制苗毒液将制苗用细胞悬液，分装细胞培养瓶，同时接入禽脑脊髓炎病毒生产用毒种进行培养，72h时更换细胞维持液，继续培养48～72h，收获培养物，‑15℃保存；e.疫苗制备将收获的制苗毒液灭活后加入佐剂，乳化制备成禽脑脊髓炎病毒灭活疫苗。