一种花曲柳的离体快速繁殖方法

摘要

本发明公开了一种花曲柳的离体快速繁殖方法，涉及应用植物细胞全能性，在短时期产生大量遗传性一致的花曲柳（Fraxinus rhynchophylla Hance.）种苗的技术,以克服传统繁殖技术存在的周期长、效率低等问题。本发明以花曲柳休眠芽为外植体，经过诱导培养、增殖培养、生根诱导、炼苗及移栽等过程建立了花曲柳组培快繁体系，以实现花曲柳优良遗传资源的快速繁殖，为我国的经济建设提供更多更好的珍贵木材和林产品。

主权项

一种花曲柳的离体快速繁殖方法，其特征在于包括以下步骤： （1）丛生芽诱导：采取花曲柳休眠枝条后置于室内水培萌至发芽,水培萌发抽出的嫩枝用软毛刷蘸洗衣粉水轻轻刷洗，切成3.0～5.0cm长的带有2～3个腋芽的节段于0.2%高锰酸钾溶液中磁力搅拌20～40min，自来水冲洗1～3h后置于超净工作台中，先用75%乙醇消毒5～30s后用无菌水洗3～5次，再用0.1%升汞溶液消毒5～15min，用无菌水冲洗4～6次再用无菌滤纸擦干表面的水珠后剪成长2.0～3.0cm带芽茎段并接种到诱导培养基进行诱导培养,接种后先在25～28℃条件下全暗培养1～5天，然后置于每天光照10～12小时，光照强度为1500～3000lx，直至诱导形成丛生芽;（2）增殖培养：将步骤（1）诱导培养得到的丛生芽切割成并接种于增殖培养基上进行继代培养，接种后先在25～28℃条件下全暗培养1～3天，然后置于每天光照12～14小时，光照强度为2000～3000lx，置于培养温度为25～28℃的条件下培养，多次反复切割进行继代培养，以得到更多的丛生芽;（3）生根培养：将步骤（2）过程获得的丛生芽切割成2.0～3.0cm带芽茎段并接种到生根培养基上进行诱导培养，接种后先在25～28℃条件下全暗培养1～3天，然后置于每天光照12～15小时，光照强度为2000～3000lx，培养温度为25～28℃的条件下培养至生根;（4）炼苗移栽：将步骤（3）获得的高3.0～4.0cm的根系发达且叶片展的健壮试管苗在培养室内敞口炼苗3～5天，仔细洗净在根系上附着的培养基,移栽到草炭土:蛭石:珍珠岩＝5:4:1的混合基质中，保持湿度90%以上，以塑料薄膜覆盖5～10天后揭去，15天后统计成活率。