一种野生甜樱桃木组培快繁的方法

摘要

本发明公开了一种野生甜樱桃木组培快繁的方法，它包括以下步骤：S1.切取外植体；S2外植体灭菌；S3.诱导培养：将灭菌后的带芽茎段接种于诱导培养基中进行培养，可诱导腋芽萌发；S4.继代培养：将已萌发的腋芽接种于继代培养基中进行培养，可诱导丛生芽产生；S5.生根培养：将切割的丛生芽接种于生根培养基中进行培养，可诱导其生根；S6.炼苗移栽。本发明采用组培繁殖的手段成功获得四川省巴中市南江县本地野生甜樱桃的无菌苗，并建立组培快繁体系，可在短时间内获得大量无菌后代，即能保持母本原有的优良性状，又能减少病虫害的发生，为实现野生甜樱桃规模工厂化生产提供了基础材料。

主权项

一种野生甜樱桃木组培快繁的方法，它包括以下步骤：S1. 切取外植体：于晴天中午或下午采集无病害的野生甜樱桃的当年生枝条，去除多余叶片，切取外植体，于流水中冲洗5～10min后，吸干水分；S2. 外植体灭菌：将冲洗后的外植体放入超净工作台，用浓度为70～75%的酒精消毒25～35s，用无菌水冲洗4～6次，再放入浓度为0.1～0.2%的升汞中灭菌3～8min，用无菌水冲洗4～6次，置于无菌纸上晾干；S3. 诱导培养：将灭菌后的外植体接种于诱导培养基中进行培养，培养条件为：光照强度2000～3000LX，温度24～26℃，经诱导培养，可诱导腋芽萌发；S4. 继代培养：经诱导培养后进行继代培养，培养条件为：光照强度2000～3000LX，温度24～26℃，经继代培养后，可诱导丛生芽产生；S5. 生根培养：切割丛生芽，将丛生芽接种于生根培养基中进行培养，其中，生根培养基为1/2MS+NAA0.2mg/L+蔗糖30g/L+琼脂10g/L，pH值为5.5～6.5，培养条件为：光照强度2000～3000LX，光照时间14～18h，温度24～26℃，培养时间8～12d，经生根培养后，可诱导其生根；S6. 炼苗移栽：将生长达8～12cm的生根组培苗从培养室取出，置于室外培养后，洗掉组培苗上的培养基，保持温度和湿度移植于基质中；其特征在于：（1）步骤S1中所述外植体为带芽茎段；（2）步骤S3中所述的诱导培养基为MS+6‑BA 3.0mg/L+IAA 0.5mg/L+蔗糖30g/L+琼脂10g/L，pH值为5.5～6.5，光照时间14～18h，培养时间14～17d；（3）步骤S4中所述的继代培养为：将经诱导培养后已萌发的腋芽剪下，接种于继代培养基中进行培养，其中，继代培养基为MS+6‑BA2.0mg/L+IAA 0.5mg/L+蔗糖30g/L+琼脂10g/L，pH值为5.5～6.5，光照时间14～18h，培养时间27～32d；（4）步骤S6中所述室外培养的时间为4～7d，保持的温度和湿度分别为22～26℃、68～75%，所述移植基质为腐殖土混合蛭石，混合比例为1～2:1。