检测H7亚型禽流感病毒的电化学免疫传感器及其制备方法

摘要

本发明公开了一种检测H7亚型禽流感病毒的电化学免疫传感器，包括工作电极、参比电极和对电极，工作电极是利用甲壳胺修饰石墨烯负载金纳米粒子并得到石墨烯-甲壳胺-金纳米粒子纳米复合物，将纳米复合物用于修饰金电极，而后固定H7亚型禽流感病毒单克隆抗体而得。实验显示，本发明对目标病毒H7的检测敏感度为10^2.3EID₅₀/mL，对非目标禽病原体，检测时其特征吸收峰没有发生改变，表明该传感器具有很高的敏感性和特异性，在病原微生物快速检测领域具有良好的应用前景。

主权项

一种检测H7亚型禽流感病毒的电化学免疫传感器，包括工作电极、参比电极和对电极，其特征在于：所述工作电极是利用甲壳胺修饰石墨烯负载金纳米粒子并得到石墨烯‑甲壳胺‑金纳米粒子纳米复合物，将纳米复合物用于修饰金电极，而后固定H7亚型禽流感病毒单克隆抗体而得；所述参比电极为饱和甘汞电极，对电极为铂丝电极；所述工作电极按以下步骤制备：<1>石墨烯‑甲壳胺‑金纳米粒子纳米复合物的制备将0.5g的甲壳胺加入到100mL体积浓度1.0％醋酸溶液中，室温下条件下磁力搅拌1h，得到0.5wt％甲壳胺溶液；将1mg石墨烯加入到1mL 0.5wt％甲壳胺溶液超声2h，得到稳定的石墨烯‑甲壳胺悬浊液；取1mL质量浓度1.0％HAuCl₄溶液加入到制备好的石墨烯‑甲壳胺悬浊液中，室温下搅拌30min，然后水浴加热至80℃继续反应1h，得到石墨烯‑甲壳胺‑金纳米粒子纳米复合物；<2>工作电极的制备用移液枪移取8μL步骤<1>的石墨烯‑甲壳胺‑金纳米粒子纳米复合物涂到直径为3毫米的金电极表面，4℃下自然晾干，然后滴涂15μL 0.1mg/mL H7亚型禽流感病毒单克隆抗体置于4℃下反应8小时，再滴涂15μL 1wt％BSA溶液37℃下封闭1h，取出用二次去离子水洗净，即可。