竞争性示差筛选

摘要

本发明涉及用于筛选的新方法。具体而言，本方明提供竞争性示差筛选的方法。在一些优选的实施方式中，本方明提供了帮助紧密结合物的鉴定的竞争性示差筛选方法。在一些优选的实施方式中，本发明的方法中所使用的试剂包括紧密结合物和弱结合物。在其它实施方式中，本发明提供了采用识别和结合靶标的竞争性结合物的方法，但所述竞争性结合物具有弱于目标结合物的结合。

主权项

分离至少一种目标结合物的方法，所述方法包括步骤：i)使靶标群与试剂收集物接触，其中所述试剂收集物具有操纵浓度，在使得至少一部分所述靶标群结合于至少一部分所述试剂以产生具有至少一个目标试剂的结合的靶标群的条件下进行，其中所述操纵浓度选自：试剂收集物浓度为所述靶标群浓度的1x10^‑3至1x10³倍；所述试剂收集物中每一单独试剂的浓度为目标结合物对所述靶标的期望解离常数的1x10^‑4至1x10²倍；和所述试剂收集物包括至少一种竞争结合物，所述竞争结合物对所述靶标具有预先确定的解离常数；ii)洗涤所述结合的靶标群，以除去未结合于所述靶标群的试剂；和iii)区分、分离并鉴定所述至少一种目标试剂，其中所述试剂收集物是由BBI‑环‑BLA制备的蛋白质文库，所述竞争结合物是大肠杆菌素Ecotin。