用于检测FMDV、VSV、SVDV、PPRV和BTV的基因芯片及其检测方法

摘要

本发明公开了一种用于检测FMDV、VSV、SVDV、PPRV和BTV的基因芯片及其检测方法，包括口蹄疫病毒(A型、亚洲I型、O型)、水疱性口炎病毒、猪水疱病病毒、小反刍兽疫病毒和蓝舌病病毒的检测。通过标准毒株基因组序列分析设计PCR引物，对目的基因克隆及测序分析，然后设计特异性探针，可对口蹄疫病毒、水疱性口炎病毒、猪水疱病病毒、小反刍兽疫病毒和蓝舌病病毒进行同时检测。本发明旨在建立一种灵敏度高、特异性强、节时省力并且易于观察结果的微阵列芯片检测口蹄疫病毒、水疱性口炎病毒、猪水疱病病毒、小反刍兽疫病毒和蓝舌病病毒的方法。

主权项

用于检测FMDV、VSV、SVDV、PPRV和BTV的基因芯片，包括：PCR反应混合液管、Taq聚合酶、PCR阳性对照、PCR阴性对照、ddH₂O、检测芯片、芯片探针的点样分布、芯片盖片、杂交液、杂交阳性对照和杂交盒，采用基因芯片微量点样技术，将待测样品探针与各种质控探针固定在经过化学修饰的醛基基片上，形成的微阵列，其特征是：所述微阵列包括质控探针区和待测样品探针区，其中所述质控探针区内设置下述分区：点样位置质控分区(P1)，包含至少一个点样位置质控探针:SEQ ID NO.9；杂交阳性质控分区(P2)，包含至少一个杂交阳性质控探针:SEQ ID NO.10；杂交阴性质控分区(N)，包含点样缓冲液；所述待测样品探针区包含以下至少一个待测样品探针的分区：口蹄疫病毒A型探针分区(1)，口蹄疫病毒亚洲I型探针分区(2)，口蹄疫病毒通用型探针分区(3)，口蹄疫病毒O型探针分区(4)，水疱性口炎病毒探针分区(5)，猪水疱病病毒探针分区(6)，蓝舌病病毒探针分区(7)，小反刍兽疫病毒探针分区(8)；各个探针序列如下：口蹄疫病毒A型探针：SEQ ID NO.1；口蹄疫病毒亚洲I型探针：SEQ ID NO.2；口蹄疫病毒通用型探针：SEQ ID NO.3口蹄疫病毒O型探针：SEQ ID NO.4；水疱性口炎病毒探针：SEQ ID NO.5；猪水疱病病毒探针：SEQID NO.6；蓝舌病病毒探针：SEQ ID NO.7；小反刍兽疫病毒探针：SEQ ID NO.8。