一种柿子果实色素的制备方法

摘要

本发明公开了一种柿子果实色素的制备方法，包括下述步骤:原料处理、高压微射流超微粉碎处理、发酵处理、萃取、大孔树脂柱层析、聚酰胺柱层析、葡聚糖凝胶柱层析对色素液进行吸附纯化、采用制备型液相色谱进行柿子果实色素的分离纯化，能有效除去色素液中水溶性杂质，实现色素单体的初步分离，能够有效实现柿子果实色素单体的分离，保证了产品的纯度。

主权项

一种柿子果实色素的制备方法，其特征在于，包括下述步骤：1)原料处理：将柿子清洗、破碎；2)高压微射流超微粉碎处理：将破碎后的柿子，按照1:5‑6的重量比加入纯净水，用高速剪切乳化机处理10‑20min，转速为8000‑12000r/min，然后用高压微射流超微粉碎设备于25℃进行处理，处理压力为80‑120MPa，处理次数为2‑3次，得到膏状浆液；3)发酵：将步骤2)得到的膏状浆液经过超高温瞬时灭菌，然后调整pH6.5‑7.0，按体积百分比为10‑15％接入培养成熟的乳酸菌液体菌种，放入发酵罐中发酵，发酵温度在35‑37℃，发酵时间3‑4h；4)萃取：步骤3)得到的发酵液经过超高温瞬时灭菌，用与发酵液等体积的乙酸乙酯进行反复萃取，取水层，真空浓缩除去乙酸乙酯，反复数次直至乙酸乙酯层无色；5)大孔树脂吸附纯化：选用HP‑20大孔树脂，经预处理后湿法上柱，用稀盐酸调色素液pH至3.5，用恒流泵控制色素液通过吸附柱，待流出液吸光值为上样液吸光值的10％后停止加入色素液，用纯水分数次清洗树脂表面，以pH为3.5的质量分数为90％的乙醇溶液为洗脱剂洗脱色素液，得到的色素液真空浓缩除去乙醇，得到初步纯化色素液；6)聚酰胺层析柱吸附纯化：聚酰胺经预处理后湿法装柱，步骤5)得到的初步纯化色素液过聚酰胺层析柱，以质量分数为50％的甲醇和质量分数为0.1％的甲酸混合溶液为洗脱剂，收集有色部分，洗脱液真空浓缩；7)葡聚糖凝胶柱吸附纯化：葡聚糖凝胶经预处理后湿法装柱，步骤6)得到的纯化样品过葡聚糖凝胶柱，以质量分数为50％的甲醇和质量分数为0.1％的甲酸混合溶液为洗脱剂，收集有色部分，洗脱液真空浓缩；8)制备型液相色谱分离纯化：采用制备型液相色谱对浓缩后的色素液分离纯化，得到柿子果实色素液；9)干燥：采用冷冻干燥，去除色素液的水分，得到柿子果实色素。