一种辅酶Q₁₀提取新工艺

摘要

本发明属于生物技术领域，公开了一种辅酶Q₁₀提取新工艺，以辅酶Q₁₀发酵液为原料，通过有机溶剂萃取、碱醇皂化、硅胶柱层析、无水乙醇结晶、抽滤、真空干燥得到辅酶Q₁₀产品。本发明工艺操作简单、污染低、对仪器设备要求低和成本低廉。

主权项

一种从发酵液中提取辅酶Q10的新工艺，其特征在于，所述工艺包括如下步骤：1)将深红酵母(Rhodotorula rubra)ATCC74283、球形红细菌(Rhodobacter sphaeroides)ATCC17025和脱氮副球菌(Paracoccus denitrificans)ATCC19367分别培养至成浓度为1×10⁸个/mL的菌液，按照1∶1∶2的体积比混合得到混合菌液，然后按照5％的接种量接种于发酵培养基，培养温度29℃，100rpm摇床培养30小时得到发酵液；2)在4000‑5000rpm下离心步骤1)所得发酵液30min，分离上清液与菌体细胞，将菌体细胞洗至中性，60℃烘干后粉碎；将粉碎的菌体细胞与正己烷按质量比1‑2∶2‑3混合，混匀后磁力搅拌浸提，温度55‑60℃，浸提1.5‑2h，然后经微滤膜过滤，收集提取液和截留物；3)将步骤2)得到的提取液和碱醇溶液按体积比1‑2∶2‑3混合，振荡5min，静置分层，取有机相，在温度55‑60℃真空度0.04‑0.06Mpa条件下，旋转蒸发浓缩，所得浓缩液用正己烷重溶；4)对步骤3)所得液体进行硅胶柱层析，然后在温度55‑60℃，真空度0.04‑0.06Mpa条件下旋转蒸发浓缩；将所得浓缩液溶解于无水乙醇中，0‑4℃冷藏过夜，抽真空过滤得辅酶Q₁₀胶体；最后在温度2‑10℃条件下真空干燥，即得辅酶Q₁₀产品；5)将步骤2)所得上清液和截留物合并得到复合物A，然后往复合物A中添加豆粕、酒糟、水稻秸秆粉以及麦麸，2000rpm搅拌10min，通入蒸汽升温至100℃，蒸馏30分钟；然后将蒸馏物烘干，粉碎机粉碎制得饲料；其中，复合物A、豆粕、酒糟、水稻秸秆粉以及麦麸的质量比为100∶3∶2∶1∶1。