| 发明名称 | 一种提高酶基因在酵母中高效表达的方法 | ||
| 摘要 | 一种提高酶基因在酵母中高效表达的方法Genbank中获得酶基因，用Lasergene软件分析酶基因的碱基含量、密码子、编码氨基酸数量等生物学信息，判断密码子偏爱性。根据酵母相对同义密码子数(RSCU)值，优化设计酶基因，选用酵母高频密码子，减少基因中低频密码子。调整优化基因，消除AT富含区。分析酶基因的mRNA5’及3’端非翻译区，优化设计起始密码子的旁侧序列，避免起始密码子包裹于发夹结构中。用RNAstructure5.4，GeneBeeservice(http://www.genebee.mus.su)软件分析优化基因mRNA二级结构，计算mRNA自由能ΔG值。合成最终优化基因，用相同方法分析优化基因，在合成基因上游5’端加入<i>Xba</i>I/<i>Nde</i>I/<i>Kas</i>I/<i>SnaB</i>I等酶切位点，下游3’端加入<i>NsiI</i>/<i>Nsp</i>I/<i>KpnI</i>/<i>Not</i>I等酶切位点后连接入<i>pPIC9K/pPIC3.5K</i>，获得重组表达载体<i>pP-</i>B，电转酵母中诱导表达，鉴定后获取转化子。 | ||
| 申请公布号 | CN104694565A | 申请公布日期 | 2015.06.10 |
| 申请号 | CN201310653776.9 | 申请日期 | 2013.12.09 |
| 申请人 | 四川农业大学 | 发明人 | 邹立扣;龙梅;王红宁;陈惠;吴琦;吴国艳;郭莉娟;李蓓 |
| 分类号 | C12N15/81(2006.01)I;C12N15/55(2006.01)I;C12N15/10(2006.01)I | 主分类号 | C12N15/81(2006.01)I |
| 代理机构 | 代理人 | ||
| 主权项 | 一种提高酶基因高效在酵母中高效表达的方法，该方法主要包括目的酶基因的筛选，酶基因的优化设计确定，克隆测序后在酵母细胞中成功分泌表达，酶活性检测。 | ||
| 地址 | 611830 四川省成都市都江堰市建设路288号 | ||