菊花镉耐性的评价鉴定方法

摘要

本发明公开了一种菊花镉耐性的评价鉴定方法；选取不同品种菊花的扦插幼苗进行预培养；预培养3～5d后进行镉处理，镉处理液为含Cd²⁺的Hoagland营养液，所述镉处理液中Cd²⁺浓度为0.5mg/L；镉耐性评价鉴定：镉处理30d，进行根长、根干重、丙二醛和总叶绿素含量的测定评价，获得综合得分，根据综合分大小对各品种进行综合排序：综合得分越大镉耐性越差，综合得分越小，镉耐性越强。本发明建立了镉耐性菊花品种的有效筛选指标，为菊科植物对重金属镉的抗性和修复研究提供依据。

主权项

一种菊花镉耐性的评价鉴定方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：A、选取不同品种菊花的扦插幼苗在相同的温室条件下分别进行预培养；所述预培养采用Hoagland营养液；所述不同品种菊花，每品种均取若干株，分为测定组和对照组；B、镉胁迫处理和对照处理：测定组在预培养3～5d后进行镉胁迫处理30d，镉处理液为含Cd²⁺的Hoagland营养液，所述镉处理液中Cd²⁺浓度为0.5mg/L；对照组在预培养3～5d后以Hoagland营养液进行对照处理30d；C、镉耐性评价鉴定：镉处理30d，分别进行如下测定评价：1)植株根长测定评价：测定根长，获得根长下降率；2)植株根干重测定评价：取植株根系烘干至恒重，冷却后称量根干重，获得植株根干重下降率；3)总叶绿素含量测定评价：将叶片浸渍于二甲基亚砜内，吸取萃取液；在所述萃取液中加入二甲基亚砜，得待测液；以二甲基亚砜为对照，用分光光度计测定所述待测液在645nm、663nm波长下的吸光度OD645、OD663值，叶绿素计算公式如下：Chl(mg/g FW)＝0.3×(20.2×OD645+8.02×OD663)获得总叶绿素含量下降率；4)丙二醛含量测定评价：以三氯乙酸为溶剂、加入叶片研磨，离心得样品提取液；样品提取液中加入硫代巴比妥酸，煮沸，冷却后离心，取上清液；以蒸馏水加硫代巴比妥酸的混合液作为对照，测定所述上清液在450nm，532nm，600nm波长下的吸光度，计算公式如下：MDA浓度(umol/L)＝6.45(OD532－OD600)－0.56OD450，MDA浓度(umol/g)＝MDA浓度(umol/L)×提取液体积(5ml)/植物组织鲜重(g)，获得丙二醛含量增长率；(测定组测定值—对照组测定值)/对照组测定值＝变化率；所述变化率为负值时，所述变化率的绝对值即所述下降率，所述变化率为正值时，所述变化率即所述增长率；综合得分＝根长下降率+植株根干重下降率+总叶绿素含量下降率+丙二醛含量增长率；根据综合分大小对各品种进行综合排序：综合得分越大镉耐性越差，综合得分越小，镉耐性越强。