抑灭霉菌毒素的基因工程重组高纯度抗霉菌毒素单抗和复合单抗制备方法及其组合制剂

摘要

本发明涉及抑灭霉菌毒素的基因工程重组高纯度抗霉菌毒素单抗和复合单抗制备方法及其组合制剂，制备方法包括：筛选霉菌毒素；将霉菌毒素与载体蛋白连接，制备免疫用抗原；进行免疫和细胞融合，制得杂交瘤细胞；基因克隆，构建抗霉菌毒素单抗Ig并在工程菌中表达；重组工程菌发酵放大，培养制得抗霉菌毒素抗体Ig的菌体；进行细胞破碎，过滤除菌和除病毒，经离心、纯化、层析，制备高纯度抗霉菌毒素单抗Ig和复合单抗IgC之可溶性抗体蛋白。这种抗霉菌毒素单抗和复合单抗可作为粮食除霉剂和饲料成份以及制成动物用药，采用该抗霉菌毒素单抗Ig和复合单抗IgC及其组合制剂可有效降解饲料及食品中的霉菌毒素，预防和治疗霉菌毒素中毒疾病。

主权项

一种抑灭霉菌毒素的基因工程重组高纯度抗霉菌毒素单抗和复合单抗制备方法，其特征在于，包括以下步骤：A、筛选霉菌毒素；B、将活性基团引入已选择的霉菌毒素中，再将霉菌毒素与载体蛋白连接，制备免疫用抗原；C、进行免疫和细胞融合，制得霉菌毒素对应的杂交瘤细胞；D、采用已制得的霉菌毒素之杂交瘤细胞，进行抗霉菌毒素单抗Ig的构建及其在工程菌中的表达；E、重组工程菌发酵放大，培养制得大量抗霉菌毒素单抗Ig的菌体液；F、发酵培养结束后，用管式连续流式离心机或其他离心机对菌体液上清液进行离心，从上清液中离心收集表达有抗霉菌毒素单抗Ig的菌体，分装后于20℃以下保存；G、对抗霉菌毒素单抗Ig和由多种抗霉菌毒素单抗Ig组成的复合单抗IgC进行菌体细胞破碎，然后收集抗霉菌毒素单抗Ig和复合单抗IgC之可溶性抗体蛋白的上清和包含体，经离心、纯化、层析，得到高纯度的抗体。