一种液相色谱－质谱联用分析长链多不饱和脂肪酸甘油三酯的方法

摘要

本发明涉及一种液相色谱－质谱联用技术分析长链多不饱和脂肪酸甘油三酯的方法。其特征在于：它包括如下步骤：1)长链多不饱和脂肪酸甘油三酯的液相色谱-质谱分离；2)长链多不饱和脂肪酸甘油三酯酰基位置异构体的液相色谱-质谱分离；3)在分析油脂样品(富含长链多不饱和脂肪酸甘油三酯的油脂样品)时，采用的液相色谱分离条件为步骤2)的方法，根据液相色谱－质谱数据对富含长链多不饱和脂肪酸甘油三酯的油脂样品中的长链多不饱和脂肪酸甘油三酯及其酰基位置异构体进行鉴定和定性分析。该方法具有操作简单，分析时间短的优点，可实现长链多不饱和脂肪酸甘油三酯及其酰基位置异构体的高效、高通量的检测。

主权项

一种液相色谱－质谱联用分析长链多不饱和脂肪酸甘油三酯的方法，其特征在于：它包括如下步骤：1)长链多不饱和脂肪酸甘油三酯的液相色谱‑质谱分离：长链多不饱和脂肪酸甘油三酯标准品用异丙醇溶解，配成1mg/mL的溶液，进样前用流动相稀释成0.01mg/mL，此处流动相为：90％(v/v)乙腈，10％(v/v)异丙醇；液相色谱柱为安捷伦Zorbax Eclipse Plus PAH(4.6mm×150mm i.d.)色谱柱，进样体积为10μL；采用梯度洗脱，流动相为A：乙腈、B：异丙醇；梯度洗脱：0‑30min，90％‑30％(v/v)A、10％‑70％(v/v)B，保持1min；31‑31.1min，30‑90％(v/v)A、70‑10％(v/v)B；31.1–35min，90％(v/v)A、30％(v/v)B；流速1mL/min；在该条件下同时实现8种双键数不同、当量碳数相同和不同的甘油三酯标准品的分离；2)长链多不饱和脂肪酸甘油三酯酰基位置异构体的液相色谱‑质谱分离：长链多不饱和脂肪酸甘油三酯酰基位置异构体标准品用异丙醇溶解，配成1mg/mL的溶液，进样前用流动相稀释成0.01mg/mL，此处流动相为：90％(v/v)乙腈，10％(v/v)异丙醇；进样体积为10μL，液相色谱柱为安捷伦Zorbax Eclipse Plus PAH(4.6mm×250mm i.d.)色谱柱；采用梯度洗脱，流动相为A：乙腈、B：异丙醇；梯度洗脱：0‑60min，90％‑30％(v/v)A、10％‑70％(v/v)B；保持1min，61.0‑61.1min，30‑90％(v/v)A、70‑10％(v/v)B；61.1–65min，90％(v/v)A、10％(v/v)B；流速1mL/min；在该条件下实现长链多不饱和脂肪酸甘油三酯酰基位置异构体EpEpP/EpPEp标准品的分离；3)在分析富含长链多不饱和脂肪酸甘油三酯的油脂样品时，包括如下步骤：(1)富含长链多不饱和脂肪酸甘油三酯的油脂样品用丙酮溶解，配成1mg/mL的溶液，进样前用流动相稀释成0.05mg/mL，此处流动相为：90％(v/v)乙腈，10％(v/v)异丙醇；进样体积为10μL；采用步骤2)的方法，测试富含长链多不饱和脂肪酸甘油三酯的油脂样品，得到富含长链多不饱和脂肪酸甘油三酯的液相色谱‑质谱数据；(2)根据液相色谱－质谱数据对富含长链多不饱和脂肪酸甘油三酯的油脂样品中的长链多不饱和脂肪酸甘油三酯及其酰基位置异构体进行鉴定和定性分析；其中：a)所得的数据为富含长链多不饱和脂肪酸甘油三酯的油脂样品中甘油三酯的谱图和谱峰数据；b)所述的富含长链多不饱和脂肪酸甘油三酯的油脂样品包括海豹油、鱼油或微生物油等。