一种三维重建观察细胞在载体内增殖分布的方法

摘要

本发明提供了一种三维重建观察细胞在载体内增殖分布的方法，该方法过程为：将用二甲基亚砜和磷酸盐缓冲液溶解CFDA-SE，以5uM的终浓度加入到目的细胞悬液中染色，37℃孵育6-15分钟，洗涤后将染色后的细胞封装在载体内构建三维培养体系，在不同时间点对该三维培养体系不同层面行激光共聚焦扫描并三维重建，得到仅有绿色球形荧光的重建图。经过CFDA-SE染色的细胞封装在载体内由激光共聚焦显微镜扫描后三维重建来观察细胞在载体内增殖、分布。该方法简单快捷，仅需10分钟染色，相对荧光标记抗体价格便宜，可以连续观察2个月以上。

主权项

一种三维重建观察细胞在载体内增殖分布的方法，包括以下步骤：步骤一、细胞染色：用二甲基亚砜和磷酸盐缓冲液溶解CFDA‑SE，以5微摩尔每升的最终浓度加入到目的细胞悬液中染色，37℃孵育6‑15分钟，洗涤去除残余的染色剂后得到着色目的细胞；步骤二、构建三维培养体系：将着色目的细胞封装在载体水凝胶、蛋白质、基质内构建三维培养体系；步骤三、激光共聚焦显微镜三维重建：在不同时间点对该三维培养体系不同层面行激光共聚焦显微镜扫描并进行三维重建，得到仅有绿色球形荧光的能直接观察目的细胞在载体内分布的重建图。