摘要 |
<p>Un método para identificar un aptámero que tiene una tasa de disociación (t1/2) lenta de su molécula diana, en donde el aptámero comprende al menos una pirimidina con una base modificada, comprendiendo el método: (a) poner en contacto una mezcla de candidatos con una molécula diana, en donde los ácidos nucleicos que tienen una mayor afinidad por la molécula diana con respecto a otros ácidos nucleicos de la mezcla de candidatos se unen a la molécula diana, formando complejos ácido nucleico-molécula diana y en donde la mezcla de candidatos comprende ácidos nucleicos modificados en los que una, varias o todas las pirimidinas en al menos uno, o cada uno, de los ácidos nucleicos de la mezcla de candidatos están modificadas químicamente en la posición 5 para formar una pirimidina con una base modificada; (b) separar los complejos ácido nucleico-molécula diana de la mezcla de candidatos; (c) disociar los complejos ácido nucleico-molécula diana para generar ácidos nucleicos libres; (d) amplificar los ácidos nucleicos libres para producir una mezcla de ácidos nucleicos enriquecidos en secuencias que son capaces de unirse a la molécula diana con afinidad aumentada, por lo que se puede identificar un aptámero para la molécula diana; (e) opcionalmente, repetir (a) a (d) si es necesario; (f) identificar al menos un aptámero para la molécula diana, en donde el aptámero comprende al menos una pirimidina con una base modificada, y (g) seleccionar el aptámero(s) identificado en (f) para identificar el aptámero(s) que tiene una tasa de disociación lenta (t1/2) de la molécula diana.</p> |