用于检测人乳头瘤病毒(HPV)的密切相关的血清型的测定法

摘要

用于检测人乳头瘤病毒(HPV)的多个血清型的实时Taq-Man PCR测定法，其中检测的血清型的数目超过用于检测的比色通道的数目。将生物学样品与3个寡核苷酸引物/探针组组合，以便探针和引物与靶序列退火。每一个引物/探针组至少对于生物体的特定血清型是偏向性的。第一和第二引物/探针组彼此是简并的。第三引物/探针组相对于第一和和二引物/探针组不是简并的并且辨别第三血清型。第三引物/探针组具有以这样的波长发射信号的信号部分，所述波长与由简并引物/探针组中的探针的信号部分发射的波长相同或不同。扩增和检测靶序列(如果存在的话)。

主权项

至少3个寡核苷酸引物/探针组在制备用于多重测定法的试剂盒中的用途，所述多重测定法用于检测生物体的至少一种血清型在生物学样品中的存在或不存在，其中所述测定法检测比用于检测的通道更多的血清型，包括:提供生物学样品；在使得探针和引物与靶序列退火的条件下，将所述生物学样品与至少3个寡核苷酸引物/探针组接触，每一个寡核苷酸引物/探针组包含至少一种被可检测地标记并且具有10至50的核苷酸序列长度的寡核苷酸探针和至少两种寡核苷酸引物，每一种寡核苷酸引物具有10至150的核苷酸序列长度，并且其中每一个引物/探针组至少对于生物体的特定血清型是偏向性的，其中第一和第二引物/探针组彼此是简并的，并且其中所述简并探针各自具有发射可在相同通道上被检测的信号的信号部分，并且其中第三引物/探针组相对于另外两个引物/探针组不是简并的，并且辨别第三血清型，所述第三血清型不是所述简并引物/探针组偏向于与其退火的血清型，并且其中所述第三引物/探针组具有以这样的波长发射信号的信号部分，所述波长与由所述简并探针的信号部分发射的波长相同或不同；并且其中简并引物/探针组的靶选自SEQ ID NO.36‑38；如果存在的话，扩增靶序列；和监测标记的检测，作为所述探针组对所述靶序列的杂交的指示，从而指示HPV的至少一种血清型的存在或不存在。