提高小麦幼胚植株再生率的组织培养方法

摘要

本发明公开了一种提高小麦幼胚再生率的组织培养方法。本发明所提供的提高小麦幼胚再生率的组织培养方法，包括如下步骤：1）将待培养的小麦幼胚置于愈伤组织诱导培养基上进行培养，得到胚性愈伤组织；所述愈伤组织诱导培养基中含有体积分数为0.0015-0.003‰的过氧化氢；2）将所述胚性愈伤组织转移到分化培养基上进行培养，得到再生小麦植株。本发明通过在SD2愈伤组织诱导培养基中添加H₂O₂，发现小麦幼胚再生率明显提高，对再生容易的小麦品种如扬麦18、京冬18、CB031和再生较难的小麦品种如济麦22、宁春4号、扬麦20均有效果，这对于利用基因工程途径和细胞工程途径改良优良小麦品种具有重要意义。

主权项

一种提高小麦幼胚再生率的组织培养方法，包括如下步骤：(1)将待培养的小麦幼胚置于愈伤组织诱导培养基上进行培养，得到胚性愈伤组织；所述愈伤组织诱导培养基为在SD2培养基中加入终体积分数为0.0015‑0.003‰的过氧化氢后得到的培养基；所述SD2培养基的溶剂为水，溶质及其浓度如下：NH₄NO₃1650mg/L、KNO₃1900mg/L、CaCl₂·2H₂O 440mg/L、MgSO₄·7H₂O 370mg/L、KH₂PO₄1700mg/L、KI 0.83mg/L、H₃BO₃6.2mg/L、MnSO₄·4H₂O 22.3mg/L、ZnSO₄·7H₂O 8.6mg/L、Na₂MoO₄·2H₂O 0.25mg/L、CuSO₄·5H₂O 0.025mg/L、CoCl₂·6H₂O 0.025mg/L，FeSO₄·7H₂O 27.8mg/L、Na₂‑EDTA·2H₂O 37.3mg/L、蔗糖30g/L、维生素B₁1mg/L、谷氨酰胺150mg/L、2,4‑D2.0mg/L、植物凝胶2.4g/L，pH值为6.0；(2)将所述胚性愈伤组织转移到分化培养基上进行培养，得到再生小麦植株；所述分化培养基为FHCK培养基；所述FHCK培养基的溶剂为水，溶质及其浓度如下：NH₄NO₃1650mg/L、KNO₃1900mg/L、CaCl₂·2H₂O 440mg/L、MgSO₄·7H₂O 370mg/L、KH₂PO₄1700mg/L、KI 0.83mg/L、H₃BO₃6.2mg/L、MnSO₄·4H₂O 22.3mg/L、ZnSO₄·7H₂O 8.6mg/L、Na₂MoO₄·2H₂O0.25mg/L、CuSO₄·5H₂O 0.025mg/L、CoCl₂·6H₂O 0.025mg/L，FeSO₄·7H₂O 27.8mg/L、Na₂‑EDTA·2H₂O 37.3mg/L、维生素B₁1mg/L、V_B60.5mg/L、烟酸0.5mg/L、甘氨酸2mg/L、肌醇100mg/L、蔗糖20g/L、植物凝胶2.4g/L，pH值为6.0；所述小麦的品种为如下中的任一种：扬麦18、中国春、济麦22、川农16、宁春4号、扬麦20和CB031。