髓过氧化物酶含量检测试剂盒及其制备方法

摘要

本发明公开了一种髓过氧化物酶含量检测试剂盒及其制备方法。本发明试剂盒由彼此独立的试剂Ⅰ和试剂Ⅱ组成；其中，试剂Ⅰ的组分包括：生物缓冲剂、表面活性剂、促凝剂、防腐剂、稳定剂、阻断剂、螯合剂和水；试剂Ⅱ的组分包括：包被髓过氧化物酶抗体的胶乳颗粒、生物缓冲剂、螯合剂、表面活性剂、防腐剂、助悬剂、封闭剂、稳定剂和水。本发明髓过氧化物酶含量检测试剂盒具有稳定性好、灵敏度高、特异性强等诸多优点，且检测操作简便，适合于大规模推广和应用。

主权项

一种髓过氧化物酶含量检测试剂盒，其特征在于：所述试剂盒由彼此独立的试剂Ⅰ和试剂Ⅱ组成；每1升试剂Ⅰ中各组分的用量为：三羟甲基甲胺基乙磺酸12g，吐温‑204mL，PEG‑2000015g，咪唑烷基脲1g，蔗糖15g，类风湿因子阻断剂5mL，氨基三乙酸0.5g，余量为蒸馏水或双蒸水；每1升试剂Ⅱ中各组分的用量为：包被MPO抗体的胶乳颗粒1.7g，三羟甲基甲胺基乙磺酸11g，氨基三乙酸0.5g，吐温‑202mL，咪唑烷基脲1g，海藻酸钠20g，牛血清白蛋白10g，蔗糖15g，余量为蒸馏水或双蒸水；所述包被MPO抗体的胶乳颗粒的粒径为100nm；所述包被MPO抗体的胶乳颗粒的制备方法包括：(1)羧化改性聚苯乙烯胶乳溶液的制备：取100mL粒径为100nm，浓度为1％的聚苯乙烯胶乳溶液，加入35mg EDC，再加入15mg的硫代NHS，在室温下搅拌反应40分钟，离心弃上清，再用100mL 0.12M磷酸盐缓冲液稀释分散沉淀胶乳既得羧化改性聚苯乙烯胶乳；(2)MPO抗体溶液的制备：将100μgMPO抗体用10mL0.12M磷酸盐缓冲液溶解，得到MPO抗体溶液；(3)包被MPO抗体的胶乳颗粒的制备：取10mL(2)步所制得的MPO抗体溶液，加入10mL步骤(1)制得胶乳溶液，在37℃搅拌反应3小时，加入0.4mL 0.1M甘氨酸缓冲液和4mL 10％BSA溶液，搅拌40分钟，终止反应，离心弃上清，用0.12M磷酸盐缓冲液洗涤沉淀3次，得到包被MPO抗体的胶乳颗粒。