铁皮石斛破损蒴果种子瓶播组培方法

摘要

本发明公开了铁皮石斛破损蒴果种子瓶播组培方法，属于生物技术和组织培养领域。该方法包括以下四个步骤：破损蒴果消毒前预处理、种子用紫外线灯消毒、消毒后种子的瓶播育苗、生根壮苗培养。本发明处理铁皮石斛破损蒴果种子的方法可以减少工厂化生产中对铁皮石斛蒴果的使用量，能提高种子的利用率，提高产量和减少生产成本。

主权项

铁皮石斛破损蒴果种子瓶播组培方法，其特征在于包括以下步骤：1)破损蒴果消毒前预处理：用棉花团蘸取浓度为75％的乙醇擦拭蒴果表面，避开蒴果开裂处，待乙醇自然挥发后，打开蒴果，取粉末状种子均匀地铺开在消毒容器内；2)种子用紫外线灯消毒：将含有铁皮石斛种子的消毒容器，放置在实验或生产用的无菌操作台上，风速调至最低速档位并打开紫外灯，紫外线照射1～2h；3)消毒后种子的瓶播育苗：将步骤2)消毒后的铁皮石斛种子均匀撒播抗菌种子萌发培养基上，2～3周后，种子萌发成原球，3个月后原球茎分化带有1～3片小叶的小苗，并统计种子萌发成活率；所述抗菌种子萌发培养基为MS+0.5～1mg/L NAA+10～40mg/L异噻唑啉哃+30g/L蔗糖+7.2g/L琼脂粉；4)生根壮苗培养：将步骤3)种子萌发得到的苗，转移到生根壮苗培养基内生长，2个月后观察并记录生长状况。