发明名称 |
一种用于检测LEPR基因127bp deletion可变剪接体的引物、试剂盒及检测方法 |
摘要 |
本发明涉及检测<i>LEPR</i>基因127bp deletion可变剪接体的引物以及包含该引物的试剂盒及检测方法,有效解决程序繁琐、耗时长、准确率低的问题,方法是,以待测cDNA为模板,引物对ACTB为引物,实时荧光定量PCR扩增<i>ACTB</i>内参基因,引物对P为引物,荧光定量PCR扩增的反应体系有2×SYBR<sup>®</sup>Premix Ex Taq<sup>TM</sup><img file="dest_path_544975dest_path_image001.GIF" wi="13" he="16" />,去RNA酶的超纯水,引物P-F或ACTB-F,引物P-R或ACTB-R,cDNA模板构成,反应方法是预变性、变性、退火、延伸,35~45个循环;对qPCR实时监测结果进行分析,用 2<sup>-</sup><sup>△</sup><sup>CT</sup>相对定量的方法计算,SPSS version 20.0进行差异显著性检验,本发明准确、快速、方便,适用性强。 |
申请公布号 |
CN104673910A |
申请公布日期 |
2015.06.03 |
申请号 |
CN201510077400.7 |
申请日期 |
2015.02.13 |
申请人 |
河南农业大学 |
发明人 |
刘小军;王丹丹;王台安;蒋瑞瑞;徐春林;李转见;田亚东;康相涛 |
分类号 |
C12Q1/68(2006.01)I;C12N15/11(2006.01)I |
主分类号 |
C12Q1/68(2006.01)I |
代理机构 |
郑州天阳专利事务所(普通合伙) 41113 |
代理人 |
聂孟民 |
主权项 |
一种用于检测<i>LEPR</i>基因127bp deletion可变剪接体的引物,其特征在于,包括引物对P和引物对ACTB,所述的引物对P为:上游引物,P‑F:5’‑ CTTGTGAACGATCGCATGTG ‑3’;下游引物,P‑R:5’‑ GTGGTATCTTAACTGCAAGG ‑3’;所述的引物对ACTB为:上游引物,ACTB‑F:5’‑ GAGAGAAGATGACACAGAC ‑3’;下游引物,ACTB‑R:5’‑ GTCCATCACAATACCAGTGG ‑3’。 |
地址 |
450002 河南省郑州市文化路95号 |