发明名称 |
一种乙型肝炎病毒慢性转染模型的构建方法 |
摘要 |
本发明属于生物医学领域,具体涉及一种乙型肝炎病毒慢性转染模型的构建方法。本发明方法基于高压水动力法,转染HBV质粒至造模实验鼠(优先采用4~8周龄雄性C3H/HeN),构建HBV慢性转染模型;本发明方法构建获得的乙型肝炎病毒慢性转染模型能用于研究单个或多个基因在HBV发病进程中的具体作用机制,且不需要进行小鼠转基因修饰,无免疫耐受等限制,易于获取、且成本低廉,能解决相关技术领域长期缺乏适宜HBV动物模型的问题,本发明为进一步研究HBV生活史、慢性化机制以及为疫苗与新药的筛选提供良好的动物模型。 |
申请公布号 |
CN104673834A |
申请公布日期 |
2015.06.03 |
申请号 |
CN201410038436.X |
申请日期 |
2014.01.26 |
申请人 |
上海市公共卫生临床中心 |
发明人 |
周晓辉;彭秀华;任晓楠;陈丽香;徐春华;方钟 |
分类号 |
C12N15/864(2006.01)I;A01K67/027(2006.01)I |
主分类号 |
C12N15/864(2006.01)I |
代理机构 |
上海元一成知识产权代理事务所(普通合伙) 31268 |
代理人 |
吴桂琴 |
主权项 |
一种乙型肝炎病毒慢性转染模型的构建方法,其特征在于,基于高压水动力法,转染HBV质粒至造模实验鼠,构建HBV慢性转染模型;其包括步骤:1)制备HBV质粒利用大肠杆菌扩增HBV质粒,经过试剂盒抽提获得所需的质粒,并测定质粒浓度和纯度;所述HBV质粒其包括pAAV/HBV1.2或1.3质粒,所使用载体为腺相关病毒载体pAAV,2)高压水动力法造模取SPF级雄性C3H/HeN小鼠,将5~10μg pAAV/HBV1.2或1.3质粒溶于溶于8~12%体积/小鼠体重的PBS溶液,快速转染至实验鼠;以同周龄C57BL/6小鼠作为对照;3)监测病毒学指标在小鼠中持续存在的情况,评估慢性化造模成功与否。 |
地址 |
201508 上海市金山区漕廊公路2901号 |