Modelos de animales y moléculas terapéuticas

摘要

Procedimiento para producir una célula ES de ratón que comprende regiones VDJ de humano, en donde el procedimiento comprende insertar en un genoma de célula ES de ratón (a) (i) un casete de iniciación que comprende una secuencia de esqueleto de ADN de BAC que sirve de sitio diana para la inserción de una secuencia homóloga y (ii) una secuencia homóloga al sitio de inserción deseado del sitio diana en el locus de IgH del genoma de ratón, en donde la secuencia del esqueleto se inserta mediante recombinación homóloga de la secuencia homóloga al sitio deseado de inserción con la secuencia homóloga de ratón en el genoma de la célula ES y (b) una serie de regiones V de IgH de humano, una o varias regiones D de humano y una o varias regiones J de humano insertadas en el locus de IgH de ratón por delante de una región constante de ratón; en donde las regiones de IgH de la etapa (b) están en una secuencia de esqueleto de vector de un vector, en donde la secuencia del esqueleto es la misma secuencia de esqueleto que el casete de iniciación y en donde las regiones de IgH se insertan por recombinación del vector con el sitio diana de la etapa (a), la inserción se lleva a cabo por etapas con 2 o más inserciones independientes y la inserción de las regiones de IgH dan lugar a una disposición funcional con la región constante de ratón para el anticuerpo o la producción de la cadena del anticuerpo y en donde el procedimiento de inserción comienza en el sitio donde el casete de iniciación se ha insertado en el genoma de la célula ES que proporciona una región destinataria única.