腹泻病毒检测试剂盒及检测方法

摘要

本发明适用于生物技术及医学检测技术领域，提供了一种腹泻病毒检测试剂盒及其检测方法，该检测试剂盒包含PCR反应液，该PCR反应液包含PCR缓冲液、MgCl₂、dNTP、DNA聚合酶，还包含分别针对札如病毒1型及2、4型、诺如病毒1型、诺如病毒2型、轮状病毒、腺病毒、星状病毒的引物对及探针序列，其中各条探针序列5’端均连接有荧光基团，3’端均连接有淬灭基团，该PCR反应液还包含Homo-tag。本发明的检测试剂盒可一次性检测七种与腹泻相关的病毒（亚型），相对于现有技术中的检测方法操作简便，读取结果快速，避免了假阳性。

主权项

一种PCR反应液，包含PCR缓冲液、MgCl₂、dNTP、DNA聚合酶，还包含：针对札如病毒1型的引物对SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2及探针SEQ ID NO:3；针对札如病毒2、4型的引物对SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:5及探针SEQ ID NO:6；针对诺如病毒1型的引物对SEQ ID NO:7、SEQ ID NO:8及探针SEQ ID NO:9；针对诺如病毒2型的引物对SEQ ID NO:10、SEQ ID NO:11及探针SEQ ID NO:12；针对轮状病毒的引物对SEQ ID NO:13、SEQ ID NO:14及探针SEQ ID NO:15；针对腺病毒的引物对SEQ ID NO:16、SEQ ID NO:17及探针SEQ ID NO:18；针对星状病毒的引物对SEQ ID NO:19、SEQ ID NO:20及探针SEQ ID NO:21；其中各条探针序列5’端均连接有荧光基团，3’端均连接有淬灭基团，其中所述探针SEQ ID NO:12的5’端连接的荧光基团为FAM/HEX，且连接有FAM的探针量与连接有HEX的探针量的比例为1:1.8‑1:2；所述探针SEQ ID NO:21的5’端连接的荧光基团为FAM/ROX，且连接有FAM的探针量与连接有ROX的探针量的比例为1:0.8‑1:1，所述探针序列SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:9、SEQ ID NO:15和SEQ ID NO:18上连接的荧光基团选自FAM、ROX、HEX和Cy5中的一种，所述淬灭基团为DABCYL；所述PCR反应液还包含序列为SEQ ID NO:22的Homo‑tag。