一种河豚毒素柱前衍生-高效液相荧光检测方法及基于该方法的试剂盒

摘要

本发明公开了一种河豚毒素柱前衍生-高效液相荧光检测方法，包括以下步骤：(1)制备待测品的样品溶液及河豚毒素标准品溶液；(2)取样品溶液0.4mL，加入0.2mL pH维持液，将溶液pH控制在11.6~11.9区间，然后加入0.1mL衍生试剂1和0.1mL衍生试剂2，混匀，水浴加热20min，冷却至室温，加入0.1mL终止液，使溶液pH呈中性，而后用超纯水定容；取样品溶液，加入河豚毒素标准品溶液混匀，然后进行本步骤操作进行荧光衍生；(3)采用配备荧光检测器的液相色谱仪对步骤(2)荧光衍生后的样品溶液和河豚毒素标准品溶液进行分析，对样品溶液中的河豚毒素进行定性和定量。本发明同时公开适用于该方法的试剂盒。该方法用于定性、定量检测水产品中河豚毒素，结果可靠、检测限低。

主权项

一种河豚毒素柱前衍生‑高效液相荧光检测方法，其特征在于，包括以下步骤：(1) 制备待测品的样品溶液及河豚毒素标准品溶液；(2) 荧光衍生：取样品溶液0.4m L，加入0.2m L pH维持液，将溶液pH控制在11.6~11.9区间，然后加入0.1mL衍生试剂1和0.1mL衍生试剂2，混匀，水浴加热20min，冷却至室温，加入0.1mL终止液，使溶液pH呈中性，而后用超纯水定容，取样品溶液，加入河豚毒素标准品溶液混匀，然后进行本步骤操作进行荧光衍生；其中所述衍生试剂1的 pH约为12，包括a液、b液和c液，a液、b液和c液之间的体积比为5﹕2﹕3，所述a液为次溴酸钠贮备液：0.67g溴酸钠、3.0 g溴化钠，用蒸馏水溶解并定容至10mL；所述b液为 5mol/L盐酸；所述c液为 4.81mol/L氢氧化钠；所述衍生试剂2为20%尿素；(3) 定性和定量检测：采用配备荧光检测器的液相色谱仪对步骤(2)荧光衍生后的样品溶液和河豚毒素标准品溶液进行分析，对样品溶液中的河豚毒素进行定性和定量。