发明名称 一种根肿菌单孢分离、寄主扩繁建立单孢系的方法
摘要 本发明提供了一种根肿菌单孢分离的方法,将花科作物患根肿病的根瘤经过腐熟、加水研磨以及过滤分离步骤后得到孢悬液;将上述步骤得到的溶液再用蒸馏水稀释得到稀释孢悬液;用针灸针在稀释孢悬液中挑取孢子后按压在琼脂块上,用光学显微镜观察在琼脂块上只有一个孢子后进行标记保留。还提供了一种寄主扩繁建立单孢系的方法,将琼脂块置于经过无菌处理的花科作物幼苗根毛上,培育得到患根肿病的根瘤;将根瘤研磨后倒入灭菌土中形成培育土,将经过无菌处理的花科作物种子在培育土上进行播种,培育得到患根肿病的根瘤,取出部分根瘤研磨后倒入培育土中。该分离方法挑单孢的成功率高,扩繁方法进行扩繁的土壤可长期使用,提高根瘤利用率。
申请公布号 CN104651240A 申请公布日期 2015.05.27
申请号 CN201510078561.8 申请日期 2015.02.13
申请人 四川农业大学 发明人 黄云;刘振林;彭宇龙;杨辉;尚静;李沛利;李旭利;朱娟;许璐阳;王瑶;周苗苗
分类号 C12N1/14(2006.01)I;C12R1/645(2006.01)N 主分类号 C12N1/14(2006.01)I
代理机构 北京超凡志成知识产权代理事务所(普通合伙) 11371 代理人 栾波
主权项 一种根肿菌单孢分离的方法,其特征在于,包括如下步骤:(A)将十字花科作物患根肿病的根瘤经过腐熟、加水研磨以及过滤分离步骤后得到孢悬液;(B)将上述步骤得到的溶液浓度控制在1×10<sup>7</sup>‑3×10<sup>7</sup>个孢子/ml,然后再用蒸馏水稀释30‑50倍得到稀释孢悬液;(C)用针灸针在所述稀释孢悬液中挑取孢子后按压在琼脂块上,并用光学显微镜观察在所述琼脂块上只有一个孢子后进行标记保留。
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