利用硅胶柱层析提取天然产物中脂肪酸的新方法

摘要

本发明涉及一种利用硅胶柱层析提取天然产物中脂肪酸的新方法，该方法包括以下步骤：⑴将固体天然产物粉碎得样品粉末；⑵样品粉末经抽提、浓缩后得到总类脂化合物浓缩液；⑶用二氯甲烷湿法装柱得到硅胶层析柱A；⑷将总类脂化合物浓缩液加到硅胶层析柱A得到洗脱液A；⑸倒出硅胶层析柱A中的所有硅胶颗粒，分次加入氢氟酸，直至所有硅胶颗粒完全溶蚀后萃取，得到极性馏分，该极性馏分浓缩后得到浓缩液A；⑹在浓缩液A中加三氟化硼/甲醇络合物溶液甲酯化，得到酯化液，该酯化液萃取浓缩后得到浓缩液B；⑺用乙酸乙酯湿法装柱得到硅胶层析柱B；⑻将浓缩液B加到硅胶层析柱B内经洗脱、旋蒸后即得到脂肪酸组分。本发明工艺简便、易操作。

主权项

利用硅胶柱层析提取天然产物中脂肪酸的新方法，包括以下步骤：⑴将固体天然产物粉碎至100~200目，得到样品粉末；⑵将所述样品粉末经氯仿抽提、浓缩后，得到总类脂化合物浓缩液； 所述样品粉末与所述氯仿的质量体积比为1 g：3 mL ~5 mL；⑶装柱：将4g硅胶颗粒置于50mL二氯甲烷中，搅拌，排除气泡，静置1h，使其充分溶胀后，将其置于玻璃层析柱内备用，得到硅胶层析柱A；⑷洗脱：将所述总类脂化合物浓缩液用滴管滴加到所述硅胶层析柱A内，待该总类脂化合物浓缩液全部进入所述硅胶层析柱A后，再用2mL二氯甲烷沿着所述硅胶层析柱A内表面冲三次；之后使用100mL二氯甲烷作为洗脱剂以1~2mL/min的流速进行洗脱，得到洗脱液A；待所述硅胶层析柱A中的溶剂挥发完，将所述硅胶颗粒全部倒出；⑸溶蚀：在所述步骤⑷所得的硅胶颗粒中分次加入50mL体积浓度为20%的氢氟酸，直至所有所述硅胶颗粒完全溶蚀，得到极性馏分，该极性馏分用50mL氯仿萃取三次，得到萃取液A，该萃取液A浓缩至3~5mL，得到浓缩液A；⑹衍生化：在所述浓缩液A中加10mL质量浓度为14%的三氟化硼/甲醇络合物溶液，并在温度为60~70℃的条件下甲酯化1~2h，得到含脂肪酸甲酯的酯化液，该酯化液用20mL二氯甲烷萃取三次，得到萃取液B，该萃取液B浓缩至3~5mL，得到浓缩液B；⑺再次装柱：将4g硅胶颗粒置于50mL乙酸乙酯中，搅拌，排除气泡，静置1h，使其充分溶胀后，将其置于玻璃层析柱内备用，得到硅胶层析柱B；⑻洗脱与收集：将所述浓缩液B用滴管滴加到所述硅胶层析柱B内，待该浓缩液B全部进入所述硅胶层析柱B后，再用2mL二氯甲烷沿着所述硅胶层析柱B内表面冲三次；使用150mL二氯甲烷作为洗脱剂以1~2mL/min的流速进行洗脱，得到洗脱液B，该洗脱液B收集在圆底烧瓶内，浓缩至恒重后即得到脂肪酸组分。