鼠李糖诱导型启动子及其应用

摘要

本发明公开了鼠李糖诱导型启动子及其应用。本发明首先公开了从毕赤酵母中分离的核苷酸序列为SEQ ID NO.1所示的鼠李糖诱导型启动子。本发明还公开了含有所述鼠李糖诱导型启动子的重组真核表达载体及宿主细胞。本发明进一步提供了一种调控目的异源性基因在毕赤酵母中进行适时、适量表达的方法，包括：用所述的鼠李糖诱导型启动子和待表达的目的异源性基因构建真核表达载体；将构建的真核表达载体转化到酵母中得到重组酵母；通过控制培养基中诱导物鼠李糖的添加量和添加时间来调控目的蛋白适时、适量的表达，实现外源蛋白表达的精确控制。

主权项

从毕赤酵母(Pichia pastoris)中分离的鼠李糖诱导型启动子，其特征在于，其多核苷酸序列为(a)、(b)、(c)或(d)所示：(a)、SEQ ID NO.1所示的多核苷酸序列；或(b)、与SEQ ID NO.1的互补序列在严谨杂交条件能够进行杂交的多核苷酸，该多核苷酸仍具有鼠李糖诱导型启动子的功能；或(c)、与SEQ ID NO.1的多核苷酸序列至少有60％以上同源性的多核苷酸序列，且该多核苷酸具有鼠李糖诱导型启动子的功能；优选的，其与SEQ ID NO.1的多核苷酸序列至少有80％以上同源性的多核苷酸序列，且该多核苷酸具有鼠李糖诱导型启动子的功能；更优选的，其与SEQ ID NO.1的多核苷酸序列至少有90％以上同源性的多核苷酸序列，且该多核苷酸具有鼠李糖诱导型启动子的功能；最优选的，其与SEQ ID NO.1的多核苷酸序列至少有95％以上同源性的多核苷酸序列，且该多核苷酸具有鼠李糖诱导型启动子的功能；或(d)、在SEQ ID NO.1的基础上进行一个或多个碱基的缺失、取代或插入获得的多核苷酸变体，且该多核苷酸变体仍具有鼠李糖诱导型启动子的功能。