快速鉴定辣椒疫霉PcORP1基因核苷酸点突变及其对氟噻唑吡乙酮抗药性的方法

摘要

本发明涉及辣椒疫霉氧化固醇结合蛋白相关基因PcORP1核苷酸点突变的鉴定及其在杀菌剂氟噻唑吡乙酮抗性监测中的应用，具体公开了两种鉴定辣椒疫霉PcORP1基因2379位核苷酸突变对氟噻唑吡乙酮产生抗药性的分子检测方法及其专用引物。所述突变位点指辣椒疫霉菌中PcORP1基因的自5’末端起第2379位核苷酸为G和T杂合或T纯合。由此导致PcORP1蛋白的自N端起第769位氨基酸为甘氨酸与色氨酸杂合或纯合的色氨酸。本发明提供的分子检测方法，灵敏度高、稳定性好、检测周期短，可用于高通量地监测田间辣椒疫霉对杀菌剂氟噻唑吡乙酮的抗性基因频率以及抗性发生和发展情况，实现抗性病害的早期预警，指导及时调整辣椒疫霉防治策略，合理用药，延缓抗药性的发生和发展，并在病害的可持续管理系统中发挥重要的作用。

主权项

一种检测或辅助检测辣椒疫霉菌中PcORP1基因是否存在突变位点的方法，包括如下步骤：以待测辣椒疫霉菌的基因组DNA为模板，用SEQ ID NO：1和SEQ ID NO：2所示引物对进行PCR扩增，若能扩增出494bp条带，则所述待测辣椒疫霉菌中PcORP1基因存在或候选存在突变位点；所述PCR扩增中，退火温度为54.4℃。所述突变位点指辣椒疫霉菌中PcORP1基因的自5’末端起第2379位核苷酸为G和T杂合或T纯合。由此导致PcORP1蛋白的自N端起第769位氨基酸为甘氨酸与色氨酸杂合或纯合的色氨酸。