| 发明名称 | 一种利用CRISPR/Cas9系统定点突变P/TMS12-1获得温敏不育系的方法 | ||
| 摘要 | 本发明公开了一种利用CRISPR/Cas9系统定点突变PTMS12-1获得温敏不育系的方法，包括克隆控制培矮64S温敏不育的主效基因P/TMS12-1片段；根据P/TMS12-1序列设计靶标序列；构建含靶标序列片段的pU3-gRNA载体；构建pCRISPR/Cas9载体；利用上述含靶标序列片段的pCRISPR/Cas9载体获得阳性转基因苗；从阳性转基因苗中筛选突变植株；将突变植株传代种植获得不带转基因成分的温敏不育株系。本发明利用CRISPR/Cas9系统，彻底失活P/TMS12-1非编码RNA的活性，人工培育获得不带转基因成分的温敏不育系，具有目的性强，基因组损伤小等优点，避免转基因的影响。 | ||
| 申请公布号 | CN104651392A | 申请公布日期 | 2015.05.27 |
| 申请号 | CN201510009526.0 | 申请日期 | 2015.01.06 |
| 申请人 | 华南农业大学 | 发明人 | 庄楚雄;周海;黄志丰;姜大刚;李静 |
| 分类号 | C12N15/82(2006.01)I;C12N15/11(2006.01)I;A01H5/00(2006.01)I | 主分类号 | C12N15/82(2006.01)I |
| 代理机构 | 广州市越秀区哲力专利商标事务所(普通合伙) 44288 | 代理人 | 汤喜友 |
| 主权项 | 一种利用CRISPR/Cas9系统定点突变P/TMS12‑1获得温敏不育系的方法，其包括以下步骤：1)克隆控制培矮64S温敏不育的主效基因P/TMS12‑1片段；2)利用CRISPR/Cas9系统根据上述P/TMS12‑1片段序列设计靶标序列；3)构建含靶标序列片段的pU3‑gRNA载体；4)利用上述pU3‑gRNA载体构建含靶标序列片段的pCRISPR/Cas9载体；5)利用上述含靶标序列片段的pCRISPR/Cas9载体获得阳性转基因苗；6)利用上述阳性转基因苗获得突变植株；7)将上述突变植株传代种植后获得不带转基因成分育性恢复可育的植株作为温敏不育株。 | ||
| 地址 | 510642 广东省广州市天河区五山 | ||