一种脱细胞板层角膜基质片的制备方法

摘要

本发明公开了一种脱细胞板层角膜基质片的制备方法，该方法取新鲜动物眼球进行消毒；消毒后用蘸有酒精的滤纸处理，然后擦除去净上皮细胞层；在手术显微镜下做角膜缘切口，伸入虹膜恢复器分离前层角膜，分离完全后用角膜剪剪下前层角膜；用角膜环钻取出板层角膜；将新鲜板层角膜经血清浸泡之后进行漂洗或冰浴电泳处理；处理完毕后进行梯度脱水，即得到未干燥板层组织工程角膜支架，采用环氧乙烷灭菌处理，保存备用；将未干燥角膜基质片放于24孔板内进行干燥，得到干燥脱细胞板层角膜；将干燥后的样品进行钴60消毒，复水处理，得到复水板层角膜基质片。本发明得到的角膜基质片透明度高、结构破坏少、生物相容性好、性能与新鲜角膜接近、脱细胞彻底。

主权项

一种脱细胞板层角膜基质片的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤一，取新鲜动物眼球进行消毒；步骤二，消毒后用蘸有酒精的滤纸处理，然后擦除去净上皮细胞层；步骤三，在手术显微镜下做角膜缘切口，伸入虹膜恢复器分离前层角膜，分离完全后用角膜剪剪下前层角膜；步骤四，用角膜环钻取出板层角膜；步骤五，将新鲜板层角膜经过血清浸泡，然后将浸泡后的板层角膜基质片进行漂洗或冰浴电泳处理；步骤六，将漂洗或电泳处理完毕的板层角膜基质片进行梯度脱水，即得到未干燥板层组织工程角膜支架，采用环氧乙烷灭菌处理，保存备用；步骤七，将未干燥角膜基质片放于24孔板内进行干燥，得到干燥脱细胞板层角膜；步骤八，将干燥后的样品进行钴60消毒，进行复水处理，得到复水板层角膜基质片，即得所述的板层组织工程角膜基质支架，保存备用。