发明名称 高通量测序文库的构建方法
摘要 本发明公开了一种高通量测序文库的构建方法。该方法包括:S1,用引物混合物进行多重PCR得到多个目标片段;S2,对多个目标片段接头连接得到多个带接头的目标片段;以及S3,对多个带接头的目标片段进行乳液PCR得到高通量测序文库;引物混合物为cDNA引物混合物和/或DNA引物混合物;cDNA引物混合物包括SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2所示第1对引物以及SEQ ID NO:3和SEQ ID NO:4所示第2对引物;DNA引物混合物包括SEQ ID NO:5和SEQ ID NO:6所示第3对引物以及SEQ ID NO:7和SEQ ID NO:8所示第4对引物。该方法可有效提高检测通量。
申请公布号 CN104630372A 申请公布日期 2015.05.20
申请号 CN201510078568.X 申请日期 2015.02.13
申请人 天津诺禾致源生物信息科技有限公司 发明人 曹志生;李宗文;张宝亮;张兰英;丁雪;宋超;孟雪红;魏龙刚;尹静妮;刘聪
分类号 C12Q1/68(2006.01)I;C12N15/10(2006.01)I;C40B50/06(2006.01)I 主分类号 C12Q1/68(2006.01)I
代理机构 北京康信知识产权代理有限责任公司 11240 代理人 吴贵明;张永明
主权项 一种高通量测序文库的构建方法,其特征在于,所述构建方法包括以下步骤:S1,利用引物混合物对多个目标区域进行多重PCR,得到多个目标片段;S2,对多个所述目标片段接头连接,得到多个带接头的目标片段;以及S3,对多个所述带接头的目标片段进行乳液PCR,得到所述高通量测序文库;其中,所述引物混合物为cDNA引物混合物和/或DNA引物混合物;当所述混合引物为cDNA引物混合物时,所述cDNA引物混合物包括SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2所示的第1对引物以及SEQ ID NO:3和SEQ ID NO:4所示的第2对引物;当所述混合引物为DNA引物混合物时,所述DNA引物混合物包括SEQ ID NO:5和SEQ ID NO:6所示的第3对引物以及SEQ ID NO:7和SEQ ID NO:8所示的第4对引物。
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