一种双功能配体靶向树突状细胞肿瘤疫苗及其制备方法

摘要

本发明涉及一种双功能配体靶向树突状细胞的肿瘤疫苗及其制备方法，该方法包括以下步骤：S1、制备甘露糖修饰的纳米脂质体；S2、将CpG-ODN连接至纳米脂质体上得到双功能配体修饰的纳米脂质体；S3、通过反复融冻法从肿瘤细胞中提取出肿瘤抗原肽；S4、通过冻干-再水化法将肿瘤抗原肽包裹进所述功能配体修饰的纳米脂质体内。本发明采用双功能配体修饰的纳米脂质体作为载体，脂质体表面的甘露糖分子能特异性靶向至树突状细胞，CpG-ODN则结合于树突状细胞内的Toll样受体9，促进树突状细胞成熟，成熟的树突状细胞能高效递呈纳米脂质体内部释放出的肿瘤抗原肽，激活T淋巴细胞，产生特异性抗肿瘤作用。

主权项

一种双功能配体靶向树突状细胞的肿瘤疫苗的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：S1、将棕榈酰油酰磷脂酰胆碱、胆固醇、聚乙二醇2000‑二硬脂酰磷脂酰乙醇胺、双十二烷基二甲基溴化铵、软脂酸‑甘露糖酯、α‑生育酚按照摩尔比为49.8：40：5：3：2：0.2的比例混合后，通过真空旋转蒸发后干燥，再重悬过滤得甘露糖修饰的纳米脂质体；S2、使用磷脂酰乙醇胺‑聚乙二醇‑马来酰亚胺制备胶束液，将CpG‑寡聚脱氧核苷酸溶液加入所述胶束液中，在氮气氛围中反应30‑60分钟，加入与磷脂酰乙醇胺‑聚乙二醇‑马来酰亚胺等摩尔的β‑半胱胺，孵育30‑60分钟；随后将孵育液加入步骤S1制得的甘露糖修饰的纳米脂质体的溶液中，反应30‑45分钟，得到双功能配体修饰的纳米脂质体；S3、通过反复融冻法从肿瘤细胞中提取肿瘤抗原肽；S4、通过冻干‑再水化法将肿瘤抗原肽包裹进所述功能配体修饰的纳米脂质体内得双功能配体靶向树突状细胞的肿瘤疫苗。